藍(lán)細(xì)菌中的ictB蛋白能高效轉(zhuǎn)運(yùn)和濃縮CO2從而提高細(xì)胞光合速率,我國(guó)科學(xué)家構(gòu)建了葉片特異性啟動(dòng)子Cab(葉綠體捕光色素蛋白Cab基因啟動(dòng)子)驅(qū)動(dòng)的藍(lán)細(xì)菌ictB基因表達(dá)載體,并通過(guò)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法獲得了轉(zhuǎn)ictB基因水稻,大大提高了水稻的產(chǎn)量。在ictB基因載體的構(gòu)建中,含Cab啟動(dòng)子和ictB基因的重組DNA分子和Ti質(zhì)粒的酶切位點(diǎn)如圖1所示。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:
(1)為使重組DNA分子能定向插入T-DNA中,可用PCR的方法在重組DNA分子兩端添加限制酶識(shí)別序列,據(jù)圖可知,M端添加的序列所對(duì)應(yīng)的限制酶是 BglⅠBglⅠ,N端添加的序列所對(duì)應(yīng)的限制酶是 EcoRVEcoRV。經(jīng)過(guò)酶切的重組DNA分子和Ti質(zhì)粒進(jìn)行連接時(shí),可選用 DNA連接酶DNA連接酶(填“E.coli DNA連接酶”或“DNA連接酶”)。添加了限制酶識(shí)別序列的重組DNA分子與Ti質(zhì)粒的重組過(guò)程共需要 44種酶。
(2)將農(nóng)桿菌液浸泡過(guò)的水稻愈傷組織進(jìn)行植物組織培養(yǎng),培養(yǎng)基中需加入 潮霉素潮霉素進(jìn)行篩選,最終獲得多個(gè)水稻株系a1、a2、a3、a1。對(duì)a1~a1四個(gè)水稻株系的ictB蛋白表達(dá)量進(jìn)行測(cè)定,結(jié)果如圖2,其中a4株系ictB蛋白表達(dá)量較低的原因可能是 a4水稻株系中目的基因未表達(dá)a4水稻株系中目的基因未表達(dá),檢測(cè)應(yīng)選用的植物器官是 葉片葉片,原因是 Cab啟動(dòng)子是葉片特異性啟動(dòng)子,它使ictB基因只能選擇性的在葉片中表達(dá)Cab啟動(dòng)子是葉片特異性啟動(dòng)子,它使ictB基因只能選擇性的在葉片中表達(dá)。
【考點(diǎn)】植物的組織培養(yǎng).
【答案】BglⅠ;EcoRV;DNA連接酶;4;潮霉素;a4水稻株系中目的基因未表達(dá);葉片;Cab啟動(dòng)子是葉片特異性啟動(dòng)子,它使ictB基因只能選擇性的在葉片中表達(dá)
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/11/24 17:0:1組卷:10引用:2難度:0.7
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1.下列技術(shù)或方法與原理相符的是( ?。?/h2>
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3.利用植物的莖尖或葉片、莖段、花藥、花粉等,在無(wú)菌條件下,培養(yǎng)在玻璃器皿中人工配制的培養(yǎng)基上,使它發(fā)育成完整的植株。這種技術(shù)可以用來(lái)培育植物新品種,可以在較短的時(shí)間內(nèi)大量繁殖植物,還可以防止植物病毒的危害。下列關(guān)于這種技術(shù)的敘述,正確的是( ?。?br />①這種技術(shù)利用了植物細(xì)胞的全能性②這種技術(shù)叫做組織培養(yǎng),可以克隆生物體③這種技術(shù)屬于細(xì)胞工程的應(yīng)用領(lǐng)域之一④這種技術(shù)是一種無(wú)性繁殖的方式。
發(fā)布:2024/12/31 3:30:1組卷:39引用:10難度:0.5
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