普通棉花中含β-甘露糖苷酶基因（GhMnaA2），其能在纖維細(xì)胞中特異性表達(dá)，產(chǎn)生的 β-甘露糖苷酶催化半纖維素降解，使棉纖維長(zhǎng)度變短。為了培育新的棉花品種，科研人員構(gòu)建了反義GhMnaA2基因表達(dá)載體，利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將其導(dǎo)入棉花細(xì)胞，成功獲得轉(zhuǎn)基因棉花品種，具體過程如圖所示。請(qǐng)分析回答：
（1）①和②過程中所用的限制性核酸內(nèi)切酶分別為Hindlll和BamHIHindlll和BamHI、SmalSmal。
（2）過程①中纖維細(xì)胞E6啟動(dòng)子在質(zhì)粒1上只以一種方向的相連，請(qǐng)解釋GhMnaA2基因在質(zhì)粒2上可以正向和反向兩種方向相連的原因是過程②中目的基因和質(zhì)粒形成相同的粘性末端過程②中目的基因和質(zhì)粒形成相同的粘性末端，這種操作的缺點(diǎn)是目的基因容易發(fā)生自身環(huán)化自身環(huán)化，從而影響與質(zhì)粒的拼接。
（3）基因表達(dá)載體除了圖示組成外，至少還有復(fù)制原點(diǎn)、終止子、標(biāo)記基因復(fù)制原點(diǎn)、終止子、標(biāo)記基因。
（4）過程③中需用CaCl2處理農(nóng)桿菌，目的是增加農(nóng)桿菌細(xì)胞壁的通透性增加農(nóng)桿菌細(xì)胞壁的通透性，從而使外源基因容易導(dǎo)入。
（5）過程④利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化棉花細(xì)胞的過程，整合到棉花細(xì)胞染色體DNA上去的區(qū)段是重組質(zhì)粒中的
T-DNAT-DNA部分，在植物組織培養(yǎng)前需要把與農(nóng)桿菌共培養(yǎng)后的外植體轉(zhuǎn)移到含有抗生素抗生素的培養(yǎng)基上進(jìn)行脫菌培養(yǎng)。
（6）導(dǎo)入棉花細(xì)胞內(nèi)的反義GhMnaA2基因轉(zhuǎn)錄形成的mRNA能與棉花細(xì)胞內(nèi)的GhMnaA2轉(zhuǎn)錄的mRNA互補(bǔ)配對(duì)與棉花細(xì)胞內(nèi)的GhMnaA2轉(zhuǎn)錄的mRNA互補(bǔ)配對(duì)從而阻止β-甘露糖苷酶β-甘露糖苷酶合成，使棉纖維更長(zhǎng)。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】Hindlll和BamHI；Smal；過程②中目的基因和質(zhì)粒形成相同的粘性末端；自身環(huán)化；復(fù)制原點(diǎn)、終止子、標(biāo)記基因；增加農(nóng)桿菌細(xì)胞壁的通透性；T-DNA；抗生素；與棉花細(xì)胞內(nèi)的GhMnaA2轉(zhuǎn)錄的mRNA互補(bǔ)配對(duì)；β-甘露糖苷酶
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：22引用：3難度：0.6
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發(fā)布：2024/12/20 5:0:2組卷：35引用：5難度：0.6 -
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（1）獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應(yīng)用的生物技術(shù)有（答出2項(xiàng)）等。
（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對(duì)目的基因進(jìn)行篩選。
（3）培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程（填序號(hào)）。過程②③采用的方法是。
（4）⑤過程需要用到等植物激素，在誘導(dǎo)愈傷組織分化成幼苗的過程中，這兩種植物激素的比例會(huì)發(fā)生變化，原因是。發(fā)布：2024/12/20 2:30:1組卷：16引用：5難度：0.5 -
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發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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