蛛絲（絲蛋白）被稱為“生物鋼”，有著超強的抗張強度，可制成防彈背心、降落傘繩等。蜘蛛絲還可被制成人造韌帶和人造肌腱?？茖W(xué)家研究出集中生產(chǎn)蜘蛛絲的方法，培育轉(zhuǎn)基因蜘蛛羊。目前，基因工程中使用的限制酶主要是從原核生物中分離純化獲得的。含有限制酶的細(xì)胞通常還具有相應(yīng)的甲基化酶，它可對自身DNA進(jìn)行甲基化修飾。請根據(jù)資料和圖解回答下列問題：
（1）原核細(xì)胞中的限制酶可切割外源DNA，但不破壞自身DNA，其原因可能是
①細(xì)胞自身的DNA分子沒有該限制酶的識別序列細(xì)胞自身的DNA分子沒有該限制酶的識別序列；
②甲基化酶對細(xì)胞自身的DNA進(jìn)行甲基化修飾，限制酶無法識別修飾后的DNA序列甲基化酶對細(xì)胞自身的DNA進(jìn)行甲基化修飾，限制酶無法識別修飾后的DNA序列。
（2）如圖為蛛絲蛋白基因?qū)?yīng)的DNA片段結(jié)構(gòu)示意圖。
則與之對應(yīng)的引物結(jié)合部位應(yīng)該是圖中的 2、32、3（填數(shù)字）；PCR過程中，若一個蛛絲蛋白基因擴增了4次，則消耗了引物 1414個，所得DNA中含有其中一種引物的共 66個。
（3）若想在蜘蛛羊乳汁中提取所需要的蛛絲蛋白，可以通過①過程將蛛絲蛋白基因和乳腺中特異表達(dá)特異表達(dá)的基因的 啟動子啟動子等調(diào)控元件重組在一起，該調(diào)控元件上有 RNA聚合RNA聚合酶結(jié)合位點。通過 顯微注射法顯微注射法的方法導(dǎo)入山羊的 受精卵受精卵中培育成蜘蛛羊，這樣就可以在蜘蛛羊的乳汁中提取蛛絲蛋白，這稱為 乳腺生物反應(yīng)器乳腺生物反應(yīng)器。
（4）目的基因?qū)胧荏w后，進(jìn)行了PCR檢測結(jié)果如圖（1號來自普通山羊，2號是含蛛絲蛋白基因的質(zhì)粒，3～8號來自轉(zhuǎn)基因山羊），從結(jié)果可以看出，3、5、83、5、8號山羊含有蛛絲蛋白基因。若這些成功導(dǎo)入目的基因的轉(zhuǎn)基因蜘蛛羊并沒有產(chǎn)生相應(yīng)的蛛絲蛋白，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是 蛛絲蛋白基因沒有轉(zhuǎn)錄或轉(zhuǎn)錄的mRNA沒有翻譯蛛絲蛋白基因沒有轉(zhuǎn)錄或轉(zhuǎn)錄的mRNA沒有翻譯。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】細(xì)胞自身的DNA分子沒有該限制酶的識別序列；甲基化酶對細(xì)胞自身的DNA進(jìn)行甲基化修飾，限制酶無法識別修飾后的DNA序列；2、3；14；6；特異表達(dá)；啟動子；RNA聚合；顯微注射法；受精卵；乳腺生物反應(yīng)器；3、5、8；蛛絲蛋白基因沒有轉(zhuǎn)錄或轉(zhuǎn)錄的mRNA沒有翻譯
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：9引用：4難度：0.7
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
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3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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