如圖所示為N蛋白胞外段單克隆抗體制備的流程,回答下列問題。
(1)用N蛋白胞外段作為抗原對小鼠進(jìn)行免疫后,取小鼠脾組織用 胰蛋白酶或膠原蛋白酶胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理,制成細(xì)胞懸液,在適宜環(huán)境中培養(yǎng)時需要定期更換培養(yǎng)液,目的是清除代謝產(chǎn)物,防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對細(xì)胞自身造成危害清除代謝產(chǎn)物,防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對細(xì)胞自身造成危害。在培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)大部分B淋巴細(xì)胞貼附于瓶壁表面,這樣的現(xiàn)象稱為 貼壁生長貼壁生長。
(2)將B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合,用選擇培養(yǎng)基對融合后的細(xì)胞進(jìn)行篩選,獲得雜交瘤細(xì)胞,再將其接種到96孔板上進(jìn)行克隆化克隆化培養(yǎng)和抗體檢測,篩選出的 足夠數(shù)量能產(chǎn)生N蛋白胞外段抗體足夠數(shù)量能產(chǎn)生N蛋白胞外段抗體雜交瘤細(xì)胞。
【考點(diǎn)】單克隆抗體及其應(yīng)用.
【答案】胰蛋白酶或膠原蛋白酶;清除代謝產(chǎn)物,防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對細(xì)胞自身造成危害;貼壁生長;克隆化;足夠數(shù)量能產(chǎn)生N蛋白胞外段抗體
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:6引用:1難度:0.6
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1.為實現(xiàn)對肝癌的有效治療,研究人員通過比較肝腫瘤細(xì)胞和正常細(xì)胞間的差異,篩選有效的免疫治療靶點(diǎn),制備相應(yīng)單克隆抗體并構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物。
(1)檢測發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的CLDN6蛋白能夠促進(jìn)腫瘤發(fā)生,選定其作為單克隆抗體的作用靶點(diǎn)。CLDN6蛋白是一個跨膜蛋白,包括胞外區(qū)、跨膜區(qū)和胞內(nèi)區(qū),制備免疫小鼠所用的抗原時,應(yīng)提取
(2)將CLDN6蛋白抗原注射到小鼠體內(nèi),從該小鼠脾臟中獲取
(3)將該單克隆抗體與抗癌藥物DMI 結(jié)合構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物(CLDN6-DMI)。用不同濃度的游離DMI、CLDN6-DMI或lgG-DMI(無關(guān)抗體-DMI)分別處理高表達(dá)CLDN6細(xì)胞和低表達(dá)CLDN6細(xì)胞,檢測細(xì)胞活力,結(jié)果如圖1:
由圖可知,CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達(dá)CLDN6細(xì)胞,依據(jù)是
(4)如圖2表示抗體—藥物偶聯(lián)物CLDN6-DMI的作用機(jī)制:由圖分析,CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達(dá)CLDN6細(xì)胞的原因是發(fā)布:2024/12/19 7:0:1組卷:3引用:1難度:0.6 -
2.為減少鼠源單克隆抗體可能引起的副作用,某研究團(tuán)隊對鼠源單克隆抗體F進(jìn)行改造,制備了人—鼠嵌合抗體F′,具體流程為:提取鼠源雜交瘤細(xì)胞RNA,逆轉(zhuǎn)錄后通過PCR擴(kuò)增抗體F的基因序列,將其部分序列用人的相應(yīng)抗體基因序列進(jìn)行替換,再構(gòu)建表達(dá)載體,在體外制備人﹣鼠嵌合抗體F′。為檢測抗體性質(zhì),他們測定了F′單獨(dú)與抗原作用時對抗原的結(jié)合能力以及F′和F同時與抗原作用(F′與F初始濃度相同)時F′對抗原的結(jié)合能力,結(jié)果如下圖所示。下列敘述錯誤的是( ?。?img alt="菁優(yōu)網(wǎng)" src="http://img.jyeoo.net/quiz/images/202304/369/62ee43c5.png" style="vertical-align:middle" />
發(fā)布:2024/12/19 1:0:1組卷:39引用:4難度:0.5 -
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發(fā)布:2024/12/19 6:0:1組卷:42引用:2難度:0.6
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