多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）可自動(dòng)化重復(fù)進(jìn)行圖1所示的①～③步驟，每完成一次①～③步驟稱為完成一個(gè)循環(huán)。
（1）完成PCR過(guò)程所用的Taq酶作用于磷酸二酯磷酸二酯鍵，完成該過(guò)程的三次循環(huán)后產(chǎn)生的DNA分子中含有引物B的比例為7878。
（2）某研究小組擬用PCR技術(shù)和引物2和32和3（填引物的序號(hào)）從圖2所示DNA分子中擴(kuò)增出編碼蛋白質(zhì)H的基因，并開展后續(xù)研究。
（3）通過(guò)上述PCR反應(yīng)獲得編碼蛋白質(zhì)H的基因片段后，擬將其插入質(zhì)粒pZHY1中構(gòu)建重組DNA分子pZHY2。已知在pZHY1上存在EcoRⅠ、BamHⅠ、KpnⅠ、XbaⅠ4種限制酶的識(shí)別序列（如表），則應(yīng)選用的限制酶組合是DD。
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| EcoRⅠ | BamHⅠ | KpnⅠ | XbaⅠ |
| G↓AATTC CTTAA↑G |
G↓GATCC CCTAG↑G |
GGTAC↓C C↑CATGG |
T↓CTAGA AGATC↑T |
B．EcoRⅠ和XbaⅠ
C．EcoRⅠ和KpnⅠ
D． BamHⅠ和KpnⅠ
（4）將重組DNA分子pZHY2導(dǎo)入大腸桿菌后，就可通過(guò)大規(guī)模培養(yǎng)大腸桿菌，然后制備純化的蛋白質(zhì)H。若要制備抗蛋白質(zhì)H的單克隆抗體，相關(guān)說(shuō)法中錯(cuò)誤的有
BC
BC
。（多選）A．可以用上述步驟所得純化的蛋白質(zhì)H作為抗原
B．從動(dòng)物的脾臟收集B淋巴細(xì)胞，并使之與雜交瘤細(xì)胞融合
C．單克隆抗體是經(jīng)選擇性培養(yǎng)基的篩選所得到的B淋巴細(xì)胞，進(jìn)行培養(yǎng)而產(chǎn)生的抗體
D．電刺激可用于制備單克隆抗體和植物體細(xì)胞雜交，也可用于動(dòng)物體細(xì)胞核移植
【考點(diǎn)】DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定；單克隆抗體及其應(yīng)用．
【答案】磷酸二酯；；2和3；D；BC
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【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
聲明：本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：74引用：2難度：0.6
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1．數(shù)字PCR技術(shù)是一種核酸分子絕對(duì)定量技術(shù)，其原理如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：6引用：2難度：0.6 -
2．PCR技術(shù)不僅可以擴(kuò)增目的基因，還可用于定點(diǎn)誘變目的基因等。大引物PCR就是一種定點(diǎn)突變技術(shù)。大引物PCR需要用到引物進(jìn)行兩次PCR，其操作步驟為：
①根據(jù)目的基因序列設(shè)計(jì)引物，得到兩個(gè)常規(guī)引物，分別為常規(guī)上游引物和常規(guī)下游引物；
②根據(jù)突變堿基所處序列位置設(shè)計(jì)突變上游引物，突變位點(diǎn)位于突變引物序列的中間位置
③由突變上游引物與常規(guī)下游引物進(jìn)行第一次PCR反應(yīng)得到下游大引物；
④用得到的下游大引物中和另一個(gè)常規(guī)上游引物進(jìn)行第二次PCR擴(kuò)增，得到突變目的基因序列?；卮鹣铝袉?wèn)題：
（1）PCR擴(kuò)增的第一步是使雙鏈模板DNA變性。DNA中G+C的含量與變性要求的溫度有關(guān)，DNA中G+C的含量越多，要求的變性溫度越高。其原因是。該P(yáng)CR擴(kuò)增技術(shù)所需的基本條件是種引物、原料、模板、。
（2）在第一次PCR反應(yīng)中，形成圖示雙鏈DNA至少要經(jīng)過(guò)次復(fù)制。第一次PCR的產(chǎn)物DNA的條鏈作為第二次PCR所用的引物。與X射線誘變相比，該突變技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是。
（3）如果要利用微生物進(jìn)一步克隆PCR定點(diǎn)誘變產(chǎn)物，其步驟包括：、、微生物的篩選和培養(yǎng)、從菌群中獲取更多目的基因。將獲取目的基因和質(zhì)粒進(jìn)行連接后，需先用處理農(nóng)桿菌以便將基因表達(dá)載體導(dǎo)入馬鈴薯細(xì)胞，將馬鈴薯細(xì)胞培養(yǎng)成幼苗時(shí)經(jīng)過(guò)的兩個(gè)過(guò)程是。檢測(cè)目的基因是否在馬鈴薯細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄出了mRNA，所采用的方法是。發(fā)布：2024/12/30 23:0:2組卷：32引用：3難度：0.6 -
3．下列關(guān)于DNA片段擴(kuò)增及其鑒定的說(shuō)法錯(cuò)誤的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：3引用：3難度：0.7
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