徑柳匙葉草是一種泌鹽植物。科研工作者將徑柳匙葉草液泡膜Na+/K+逆向轉(zhuǎn)運蛋白基因(TaNHX2基因)轉(zhuǎn)移到棉花細胞內(nèi),獲得了轉(zhuǎn)基因耐鹽棉花新品種。圖1是獲取的含有目的基因的DNA片段,Sau3AⅠ、EcoRⅠ、BamHⅠ為三種限制酶,圖中箭頭所指為三種限制酶的切點;圖2是三種限制酶的識別序列與酶切位點示意圖;圖3是土壤農(nóng)桿菌中用于攜帶目的基因的Ti質(zhì)粒結(jié)構示意圖,請分析回答問題:
(1)若圖1所示DNA片段是利用徑柳匙葉草的DNA直接獲得的,則該獲取目的基因的方法為從基因文庫中獲取從基因文庫中獲取。
(2)不能在徑柳匙葉草根尖分生區(qū)細胞中獲得TaNHX2基因的mRNA,其原因是基因的選擇性表達基因的選擇性表達。
(3)若用BamHⅠ切割圖1所示的DNA片段,獲得目的基因,則需選用Sau3AISau3AI切割圖3所示質(zhì)粒,以便構建基因表達載體,該方案的缺陷是出現(xiàn)目的基因和質(zhì)粒的自我環(huán)化、目的基因在質(zhì)粒上的連接方向不確定出現(xiàn)目的基因和質(zhì)粒的自我環(huán)化、目的基因在質(zhì)粒上的連接方向不確定。故切割圖1所示DNA片段的最佳方案是選用EcoRI和BamHIEcoRI和BamHI酶。
(4)用上述最佳方案構建基因表達載體,所得重組質(zhì)粒不一定能不一定能(選填“能”“不能”或“不一定能”)被BamHⅠ切割。
(5)圖3中,質(zhì)粒上的抗生素抗性基因的作用是以便篩選出含有目的基因的受體細胞以便篩選出含有目的基因的受體細胞。
(6)為了檢測技術成果,科研工作者將轉(zhuǎn)基因棉花種植在鹽堿地,觀察其生長狀況,這屬于個體個體水平的檢測。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】從基因文庫中獲??;基因的選擇性表達;Sau3AI;出現(xiàn)目的基因和質(zhì)粒的自我環(huán)化、目的基因在質(zhì)粒上的連接方向不確定;EcoRI和BamHI;不一定能;以便篩選出含有目的基因的受體細胞;個體
【解答】
【點評】
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