科研工作者將徑柳匙葉草液泡膜 Na+/K+逆向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因(TaNHX2 基因)轉(zhuǎn)移到棉花細(xì)胞內(nèi),獲得了耐鹽新品種。圖1是含有目的基因的 DNA 片段,Sau3AⅠ、EcoRⅠ、BamHⅠ為三種限制酶(Sau3AⅠ、BamHⅠ切割形成的粘性末端相同);圖2是農(nóng)桿菌 Ti 質(zhì)粒結(jié)構(gòu)示意圖。請(qǐng)分析回答問(wèn)題:
(1)將徑柳匙葉草不同基因的DNA片段導(dǎo)入受體菌的群體中儲(chǔ)存,再根據(jù)目的基因的特定序列從受體菌中提取該基因,這種獲取目的基因的方法稱為 從基因文庫(kù)中獲取目的基因從基因文庫(kù)中獲取目的基因。
(2)計(jì)劃用 EcoRⅠ分別切割圖1中DNA片段和圖2所示質(zhì)粒,以構(gòu)建基因表達(dá)載體。
①構(gòu)建表達(dá)載體需要的工具酶是限制酶、DNA連接酶限制酶、DNA連接酶;
②本方案的缺陷是:可能導(dǎo)致 目的基因和質(zhì)粒的自我環(huán)化目的基因和質(zhì)粒的自我環(huán)化以及目的基因與質(zhì)粒的反向連接。
③為避免上述缺陷,最佳方案是用 EcoRI、BamHIEcoRI、BamHI切割圖1的DNA,用 EcoRI、Sau3AIEcoRI、Sau3AI切割圖2質(zhì)粒。
(3)目的基因成功導(dǎo)入受體細(xì)胞后,還需要利用 植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)技術(shù)才能得到轉(zhuǎn)基因棉花苗,這一技術(shù)的原理是 細(xì)胞的全能性細(xì)胞的全能性。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合.
【答案】從基因文庫(kù)中獲取目的基因;限制酶、DNA連接酶;目的基因和質(zhì)粒的自我環(huán)化;EcoRI、BamHI;EcoRI、Sau3AI;植物組織培養(yǎng);細(xì)胞的全能性
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:6引用:1難度:0.6
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