人干擾素(IFN)是機(jī)體免疫細(xì)胞產(chǎn)生的一類細(xì)胞因子。用白細(xì)胞生產(chǎn)干擾素時(shí),每個(gè)細(xì)胞最多只能產(chǎn)生100~1000個(gè)干擾素分子,而用基因工程技術(shù)改造的大腸桿菌發(fā)酵生產(chǎn),在1~2天內(nèi)每個(gè)菌體能產(chǎn)生20萬(wàn)個(gè)干擾素分子。
(1)基因工程的核心步驟是 構(gòu)建基因表達(dá)載體構(gòu)建基因表達(dá)載體。此步驟需要的工具酶是 限制酶和DNA連接酶限制酶和DNA連接酶,其作用部位都是磷酸二酯鍵。圖中四環(huán)素抗性基因的作用是用于 作為標(biāo)記基因,篩選重組質(zhì)粒作為標(biāo)記基因,篩選重組質(zhì)粒。
(2)PCR技術(shù)所依據(jù)的原理是 DNA半保留復(fù)制DNA半保留復(fù)制。在PCR反應(yīng)體系中一般需要加入Mg2+的原因是 Mg2+能激活DNA聚合酶Mg2+能激活DNA聚合酶。
(3)使用大腸桿菌作為工程菌,導(dǎo)入重組質(zhì)粒時(shí)要用含 Ca2+Ca2+溶液處理,使其處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)(感受態(tài))。酵母菌或大腸桿菌都可作受體細(xì)胞,但上述過(guò)程最好選用 酵母菌酵母菌(填“酵母菌”或“大腸桿菌”),理由是 酵母菌含有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體等多種細(xì)胞器,能對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行加工酵母菌含有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體等多種細(xì)胞器,能對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行加工。
(4)干擾素基因在工程菌中也能合成人體所需的干擾素,說(shuō)明生物界中幾乎所有生物 都共用一套遺傳密碼都共用一套遺傳密碼。
(5)天然的干擾素在體外保存相當(dāng)困難,為了生產(chǎn)出耐儲(chǔ)存干擾素,科學(xué)家可通過(guò) 蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)工程獲得這種新藥,具體流程是:從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列(基因)或合成新的基因找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列(基因)或合成新的基因→使用工程菌獲得耐儲(chǔ)存的干擾素。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合.
【答案】構(gòu)建基因表達(dá)載體;限制酶和DNA連接酶;作為標(biāo)記基因,篩選重組質(zhì)粒;DNA半保留復(fù)制;Mg2+能激活DNA聚合酶;Ca2+;酵母菌;酵母菌含有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體等多種細(xì)胞器,能對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行加工;都共用一套遺傳密碼;蛋白質(zhì);推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列;找到并改變相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列(基因)或合成新的基因
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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