營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株是指野生型菌株經(jīng)過人工誘變或自然突變失去合成某種營(yíng)養(yǎng)的能力，只有在基本培養(yǎng)基中補(bǔ)充所缺乏的營(yíng)養(yǎng)因子后才能生長(zhǎng)的菌株，包括氨基酸缺陷型菌株、維生素缺陷型菌株和堿基缺陷型菌株等。篩選營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株的常規(guī)步驟為誘變育種→淘汰野生型→檢出缺陷型→鑒定缺陷型。用紫外線誘變大腸桿菌獲得營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株，誘變后常采用含青霉素的培養(yǎng)基淘汰野生型大腸桿菌，使缺陷型大腸桿菌得以富集。
（1）限量培養(yǎng)法可用于營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株的檢出，其原理是野生型菌株在限量培養(yǎng)基上獲取營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的能力強(qiáng)于營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株，如圖甲所示，其中菌落 BB（填：“A”或“B”）即為檢出的營(yíng)養(yǎng)缺陷型大腸桿菌菌株。該方法中還需將一個(gè)未接種的平板同時(shí)放在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，其目的是 作為空白對(duì)照，判斷培養(yǎng)基本身是否被雜菌污染作為空白對(duì)照，判斷培養(yǎng)基本身是否被雜菌污染。
（2）研究小組一利用生長(zhǎng)圖譜法初步確定檢出的營(yíng)養(yǎng)缺陷型大腸桿菌的類型，即在基本培養(yǎng)基乙的A～E這5個(gè)區(qū)域中分別添加不同的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，然后用 稀釋涂布平板稀釋涂布平板法將檢出的營(yíng)養(yǎng)缺陷型大腸桿菌接種在乙上，若培養(yǎng)一段時(shí)間后在乙的BC交界處長(zhǎng)出了菌落，則說明該菌株是 氨基酸和維生素氨基酸和維生素營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌。
（3）研究小組二用上述方法鑒定了某菌株屬于維生素營(yíng)養(yǎng)缺陷型，為了進(jìn)一步確定該菌株的具體類型，他們把15種維生素按照不同組合分為5個(gè)小組，用5個(gè)濾紙片分別蘸取不同小組的維生素，然后覆于接種后的瓊脂平板上培養(yǎng)一段時(shí)間。
| 組別 | 維生素組合 | ||||
| 1 | 維生素A | 維生素B1 | 維生素B2 | 維生素B6 | 維生素B12 |
| 2 | 維生素C | 維生素B1 | 維生素D2 | 維生素E | 煙酰胺 |
| 3 | 葉酸 | 維生素B2 | 維生素D2 | 膽堿 | 泛酸鈣 |
| 4 | 對(duì)氨基苯甲酸 | 維生素B6 | 維生素E | 膽堿 | 肌醇 |
| 5 | 生物素 | 維生素12 | 煙酰胺 | 泛酸鈣 | 肌醇 |
維生素B1
維生素B1
；若菌株為葉酸和生物素的雙營(yíng)養(yǎng)缺陷型大腸桿菌，則其在丙培養(yǎng)基上形成菌落的位置是 3與5的交界處
3與5的交界處
。【答案】B；作為空白對(duì)照，判斷培養(yǎng)基本身是否被雜菌污染；稀釋涂布平板；氨基酸和維生素；維生素B1；3與5的交界處
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：7引用：1難度：0.6
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（1）測(cè)定微生物細(xì)胞數(shù)量的方法很多，通常采用的有稀釋涂布平板法和顯微鏡計(jì)數(shù)法，前者往往無法進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞數(shù)量的測(cè)定，原因是；顯微鏡計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)結(jié)果一般比稀釋涂布平板法大，可能的原因是。
（2）在用顯微鏡進(jìn)行酵母菌細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí)，必須將菌液，然后應(yīng)（①蓋專用蓋玻片；②滴加酵母菌懸液；按操作的先后順序填寫序號(hào)），已知血細(xì)胞計(jì)數(shù)板規(guī)格為1mm×1mm×0.1mm,在培養(yǎng)后期對(duì)培養(yǎng)液稀釋100倍后，用顯微鏡觀察到其中某方格中酵母菌的分布情況如圖，若最終幾個(gè)樣方中平均數(shù)與其相同，則培養(yǎng)液中酵母菌的密度為個(gè)/毫升。
（3）稀釋涂布平板時(shí)，若平板中菌落數(shù)過少，隨機(jī)誤差增大。要解決這個(gè)問題可以從兩方面入手：一是保證能準(zhǔn)確計(jì)數(shù)的前提下降低稀釋度；二是將相同稀釋度下的多組數(shù)值取平均值后再進(jìn)行計(jì)算。除用于計(jì)數(shù)，稀釋涂布平板還能實(shí)現(xiàn)對(duì)目標(biāo)微生物的。發(fā)布：2024/12/19 3:30:1組卷：34引用：2難度：0.7 -
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