馬鈴薯塊莖含有大量的淀粉,富含多種維生素和無(wú)機(jī)鹽,我國(guó)已將馬鈴薯作為主糧產(chǎn)品進(jìn)行產(chǎn)業(yè)化開發(fā)。如圖是轉(zhuǎn)基因抗鹽馬鈴薯的培育過(guò)程,已知圖中不同限制酶切割后產(chǎn)生的粘性末端不同,請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題:

(1)為獲取抗鹽基因,可以從堿蓬細(xì)胞研磨液中提取抗鹽基因的mRNA來(lái)合成DNA,再利用 PCRPCR技術(shù)擴(kuò)增。
(2)如圖構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí),最好選用 EcoRⅠ和HindⅢEcoRⅠ和HindⅢ切割含目的基因的外源DNA和質(zhì)粒,不能用圖中其他限制酶切割的原因是 SmaⅠ會(huì)破壞質(zhì)粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因SmaⅠ會(huì)破壞質(zhì)粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因。構(gòu)建好的重組質(zhì)粒在抗鹽基因前要加上特殊的啟動(dòng)子,啟動(dòng)子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的 DNADNA片段。
(3)將基因表達(dá)載體導(dǎo)入農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA上的原因是 T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞并整合到受體細(xì)胞染色體DNA上T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞并整合到受體細(xì)胞染色體DNA上。通過(guò)農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用,使抗鹽基因插入到馬鈴薯細(xì)胞中的染色體DNA上,從而使抗鹽基因的遺傳特性得以在受體細(xì)胞內(nèi) 穩(wěn)定維持和表達(dá)穩(wěn)定維持和表達(dá)。
(4)從個(gè)體生物學(xué)水平上鑒定轉(zhuǎn)基因抗鹽馬鈴薯是否培育成功的方法是 將轉(zhuǎn)基因馬鈴薯幼苗栽種在鹽堿地或較高濃度鹽溶液中,觀察是否能正常生長(zhǎng)將轉(zhuǎn)基因馬鈴薯幼苗栽種在鹽堿地或較高濃度鹽溶液中,觀察是否能正常生長(zhǎng)。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合.
【答案】PCR;EcoRⅠ和HindⅢ;SmaⅠ會(huì)破壞質(zhì)粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因;DNA;T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞并整合到受體細(xì)胞染色體DNA上;穩(wěn)定維持和表達(dá);將轉(zhuǎn)基因馬鈴薯幼苗栽種在鹽堿地或較高濃度鹽溶液中,觀察是否能正常生長(zhǎng)
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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