馬鈴薯塊莖含有大量的淀粉，富含多種維生素和無(wú)機(jī)鹽，我國(guó)已將馬鈴薯作為主糧產(chǎn)品進(jìn)行產(chǎn)業(yè)化開(kāi)發(fā)。如圖是轉(zhuǎn)基因抗鹽馬鈴薯的培育過(guò)程，已知圖中不同限制酶切割后產(chǎn)生的粘性末端不同，請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題：

（1）為獲取抗鹽基因，可以從堿蓬細(xì)胞研磨液中提取抗鹽基因的mRNA來(lái)合成DNA，再利用

PCR

PCR

技術(shù)擴(kuò)增。
（2）如圖構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，最好選用

EcoRⅠ和HindⅢ

EcoRⅠ和HindⅢ

切割含目的基因的外源DNA和質(zhì)粒，不能用圖中其他限制酶切割的原因是

SmaⅠ會(huì)破壞質(zhì)粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因

SmaⅠ會(huì)破壞質(zhì)粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因

。構(gòu)建好的重組質(zhì)粒在抗鹽基因前要加上特殊的啟動(dòng)子，啟動(dòng)子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的

DNA

DNA

片段。
（3）將基因表達(dá)載體導(dǎo)入農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA上的原因是

T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞并整合到受體細(xì)胞染色體DNA上

T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞并整合到受體細(xì)胞染色體DNA上

。通過(guò)農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，使抗鹽基因插入到馬鈴薯細(xì)胞中的染色體DNA上，從而使抗鹽基因的遺傳特性得以在受體細(xì)胞內(nèi)

穩(wěn)定維持和表達(dá)

穩(wěn)定維持和表達(dá)

。
（4）從個(gè)體生物學(xué)水平上鑒定轉(zhuǎn)基因抗鹽馬鈴薯是否培育成功的方法是

將轉(zhuǎn)基因馬鈴薯幼苗栽種在鹽堿地或較高濃度鹽溶液中，觀察是否能正常生長(zhǎng)

將轉(zhuǎn)基因馬鈴薯幼苗栽種在鹽堿地或較高濃度鹽溶液中，觀察是否能正常生長(zhǎng)

。