乙型肝炎病毒是一種DNA病毒，科研人員利用基因工程制備乙型肝炎表面抗原（HbsAg）從而獲得乙肝疫苗，其過程如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：
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（1）構(gòu)建圖中基因表達載體時，限制酶應(yīng)選擇 BamHⅠ和HindⅢBamHⅠ和HindⅢ兩種酶，與只用一種限制酶相比，選用兩種限制酶操作的優(yōu)勢是 避免自身環(huán)化及便于篩選避免自身環(huán)化及便于篩選。
（2）圖中氨芐青霉素抗性基因的作用是 篩選含有乙肝表面抗原的大腸桿菌細胞篩選含有乙肝表面抗原的大腸桿菌細胞。
（3）科研人員進行步驟⑤時一般先用 鈣離子鈣離子處理大腸桿菌細胞，該操作的目的是 使大腸桿菌變成感受態(tài)狀態(tài)，易于吸收外源DNA使大腸桿菌變成感受態(tài)狀態(tài)，易于吸收外源DNA。
（4）HbsAg基因?qū)氲绞荏w細胞后，需在分子水平上檢測HbsAg基因是否在大腸桿菌中成功表達，常用 抗原—抗體雜交抗原—抗體雜交技術(shù)。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】BamHⅠ和HindⅢ；避免自身環(huán)化及便于篩選；篩選含有乙肝表面抗原的大腸桿菌細胞；鈣離子；使大腸桿菌變成感受態(tài)狀態(tài)，易于吸收外源DNA；抗原—抗體雜交
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/7/7 8:0:9組卷：2引用：3難度：0.6
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發(fā)布：2024/12/20 5:0:2組卷：35引用：5難度：0.6 -
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（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對目的基因進行篩選。
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限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識別序列及切割位點 G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 
發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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