馬鈴薯蛋白酶抑制劑Ⅱ除作為植物儲藏蛋白外，還可以作為植物抵抗昆蟲侵害的重要手段?？蒲腥藛T克隆了馬鈴薯蛋白酶抑制劑Ⅱ基因的cDNA（PINⅠ），構(gòu)建了基因表達(dá)載體（如圖），并將其轉(zhuǎn)化到水稻中，使水稻自身產(chǎn)生抗蟲蛋白而達(dá)到抗蟲目的。請回答問題。
（1）馬鈴薯蛋白酶抑制劑Ⅱ在 核糖體核糖體（填細(xì)胞結(jié)構(gòu)）中合成后運輸?shù)揭号葜袃Υ妫悦獗患?xì)胞中的 蛋白酶蛋白酶降解；昆蟲取食植物，馬鈴薯蛋白酶抑制劑Ⅱ與昆蟲消化道內(nèi)的蛋白酶形成酶—抑制劑復(fù)合物，最終導(dǎo)致昆蟲因缺乏代謝中必需的 氨基酸氨基酸而死亡。
（2）過程①表示 逆轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄。
（3）為了便于擴(kuò)增的PINⅡ基因與載體1連接，需要在引物F和引物R的 5'5'端分別添加AAGCTT序列和 TCTAGATCTAGA序列；PINⅡ擴(kuò)增完成最后一次循環(huán)后，仍需在72℃下繼續(xù)延伸5min,其主要目的是 使子鏈充分延伸使子鏈充分延伸。
（4）下列物質(zhì)中，屬于過程③正常進(jìn)行所必需的有 a、b、ea、b、e（填字母）。
a.限制酶XhoⅠb.限制酶HindⅢc.限制酶XbaⅠd.緩沖液 e.T4DNA連接酶 f.Taq DNA聚合酶
（5）過程⑦篩選時，首先將愈傷組織取出，用無菌水清洗兩遍，以除去附著于愈傷組織表面的 農(nóng)桿菌農(nóng)桿菌菌液，然后轉(zhuǎn)移到含 潮霉素潮霉素的選擇培養(yǎng)基中進(jìn)行暗培養(yǎng)，挑選抗性愈傷組織誘導(dǎo)再分化。
（6）馬鈴薯蛋白酶抑制劑Ⅱ具有誘導(dǎo)表達(dá)的特性。轉(zhuǎn)化的PINⅡ基因僅在植物受到傷害（如蟲害）后表達(dá)，其生物學(xué)意義在于既能減少 能量和物質(zhì)能量和物質(zhì)的浪費，又能延緩害蟲對馬鈴薯蛋白酶抑制劑Ⅱ產(chǎn)生 抗性抗性。
【答案】核糖體；蛋白酶；氨基酸；逆轉(zhuǎn)錄；5'；TCTAGA；使子鏈充分延伸；a、b、e；農(nóng)桿菌；潮霉素；能量和物質(zhì)；抗性
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/5/28 8:0:9組卷：6引用：4難度：0.5
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發(fā)布：2024/12/20 5:0:2組卷：35引用：5難度：0.6 -
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（1）獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應(yīng)用的生物技術(shù)有（答出2項）等。
（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對目的基因進(jìn)行篩選。
（3）培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程（填序號）。過程②③采用的方法是。
（4）⑤過程需要用到等植物激素，在誘導(dǎo)愈傷組織分化成幼苗的過程中，這兩種植物激素的比例會發(fā)生變化，原因是。發(fā)布：2024/12/20 2:30:1組卷：16引用：5難度：0.5 -
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限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識別序列及切割位點 G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 
發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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