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四尾柵藻具有環(huán)境適應(yīng)能力強和生長速度快等優(yōu)點,如果能將其進行品種改良,提高含油量,有望解決微藻生物柴油產(chǎn)業(yè)化進程的瓶頸。研究人員利用基因工程技術(shù)將油料作物紫蘇DGAT1基因?qū)胨奈矕旁?,獲得轉(zhuǎn)基因的產(chǎn)油微藻,利用地?zé)釓U水培養(yǎng),不僅能生產(chǎn)生物柴油,還能治理地?zé)釓U水。操作過程如圖,請回答下列問題:
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注:LacZ基因編碼產(chǎn)生的酶可以分解物質(zhì)X-gal,從而使菌落顯現(xiàn)出藍(lán)色。若無該基因或該基因被破壞,則菌落呈白色。
(1)將質(zhì)粒pMD19-DGAT1導(dǎo)入大腸桿菌前,通常先用Ca2+處理大腸桿菌,使細(xì)胞處于一種
能吸收周圍環(huán)境中DNA分子
能吸收周圍環(huán)境中DNA分子
的生理狀態(tài)。
(2)為了便于篩選含pMD19-DGAT1重組質(zhì)粒的大腸桿菌,該選擇培養(yǎng)基中應(yīng)添加
卡那霉素和X-gal
卡那霉素和X-gal
物質(zhì)。在培養(yǎng)基中挑取
白色
白色
顏色的大腸桿菌菌落可提取該 質(zhì)粒并獲取目的基因。
(3)由如圖推測,用
EcoRⅠ
EcoRⅠ
SmaⅠ
SmaⅠ
酶切割pMD19-DGAT1獲得DGATI基因,并與酶切后的載體pBI121連接再次構(gòu)建基因表達(dá)載體,用這兩種酶切割的目的是
保證其準(zhǔn)確插入質(zhì)粒(定向連接)并防止其出現(xiàn)自身環(huán)化等問題(或防止反向連接和自身環(huán)化)
保證其準(zhǔn)確插入質(zhì)粒(定向連接)并防止其出現(xiàn)自身環(huán)化等問題(或防止反向連接和自身環(huán)化)
。
(4)啟動子往往具有物種特異性,在載體pBI121質(zhì)粒中插入紫蘇DGAT1基因,其上游啟動子應(yīng)選擇
B
B
(填字母)。
A.紫蘇DGAT1基因啟動子      B.四尾柵藻啟動子      C.大腸桿菌啟動子
(5)為了判斷DGAT1基因是否導(dǎo)入四尾柵藻細(xì)胞,可利用
聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)
聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)
(中文全稱)等技術(shù)進行檢測。
(6)為檢測轉(zhuǎn)基因四尾柵藻對地?zé)釓U水的去污能力,研究人員設(shè)計實驗并得到相應(yīng)實驗結(jié)果如表。
指標(biāo) 總氮(mg/L) 總磷(mg/L) 氟化物(mg/L)
廢水培養(yǎng)基 23.2 4.32 4.56
培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因四尾柵藻11天后 1.9 0.45 0.84
該實驗不能說明轉(zhuǎn)DGAT1基因顯著提高了四尾柵藻的去污能力。請進一步完善實驗設(shè)計
應(yīng)添加對照組:廢水培養(yǎng)非轉(zhuǎn)基因四尾柵藻 11 天后,檢測總氮、總磷和氟化物的含量
應(yīng)添加對照組:廢水培養(yǎng)非轉(zhuǎn)基因四尾柵藻 11 天后,檢測總氮、總磷和氟化物的含量
。

【答案】能吸收周圍環(huán)境中DNA分子;卡那霉素和X-gal;白色;EcoRⅠ;SmaⅠ;保證其準(zhǔn)確插入質(zhì)粒(定向連接)并防止其出現(xiàn)自身環(huán)化等問題(或防止反向連接和自身環(huán)化);B;聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng);應(yīng)添加對照組:廢水培養(yǎng)非轉(zhuǎn)基因四尾柵藻 11 天后,檢測總氮、總磷和氟化物的含量
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/12/18 13:30:2組卷:28引用:2難度:0.5
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    發(fā)布:2024/12/20 5:0:2組卷:35引用:5難度:0.6
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    (1)獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應(yīng)用的生物技術(shù)有
     
    (答出2項)等。
    (2)為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒,應(yīng)該選擇
     
    (填酶)切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入
     
    (填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”)對目的基因進行篩選。
    (3)培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程
     
    (填序號)。過程②③采用的方法是
     
    。
    (4)⑤過程需要用到
     
    等植物激素,在誘導(dǎo)愈傷組織分化成幼苗的過程中,這兩種植物激素的比例會發(fā)生變化,原因是
     
    。

    發(fā)布:2024/12/20 2:30:1組卷:16引用:5難度:0.5
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    限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ
    識別序列及切割位點 G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG
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    發(fā)布:2024/12/20 3:30:1組卷:6引用:1難度:0.6
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