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噬菌體展示技術(shù)是將外源目標(biāo)基因插入到噬菌體外殼蛋白結(jié)構(gòu)基因的適當(dāng)位置,使目標(biāo)蛋白被展示到噬菌體表面的生物技術(shù)(如圖所示)。被展示的蛋白質(zhì)可以保持相對獨(dú)立的空間結(jié)構(gòu)和生物活性,以利于靶分子的識別和結(jié)合。請分析回答:
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(1)插入載體之前,目標(biāo)基因一般需經(jīng)PCR擴(kuò)增。PCR擴(kuò)增基因的原理是
DNA的半保留復(fù)制
DNA的半保留復(fù)制
。若目標(biāo)基因的核苷酸序列未知,但已知其臨近區(qū)域的上、下游的部分序列如下所示,請從表中所列引物中選出一對合適的引物用于目標(biāo)基因的PCR擴(kuò)增:
乙和C
乙和C
。
5′-GACGCATTACGGTAAC??????TCCAGCTTAGCAGTAA-3′
3′-CTGCGTAATGCCATTG??????AGGTCGAATCGTCATT-5′
引物Ⅰ 引物Ⅱ
5′-CTGCGTAATGCCATTG A 5′-AGGTCGAATCGTCATT
5′-GACGCATTACGGTAAC B 5′-TCCAGCTTAGCAGTAA
5′-GTTACCGTAATGCGTC C 5′-TTACTGCTAAGCTGGA
5′-CAATGGCATTACGCAG D 5′-AATGACGATTCGACCT
(2)目標(biāo)基因能夠與噬菌體外殼蛋白結(jié)構(gòu)基因拼接成功,其結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)是
它們的基本組成單位都是脫氧核苷酸,且都具有雙鏈(雙螺旋)結(jié)構(gòu)
它們的基本組成單位都是脫氧核苷酸,且都具有雙鏈(雙螺旋)結(jié)構(gòu)
;建立噬菌體展示庫需用的工具酶有
限制酶和DNA連接酶
限制酶和DNA連接酶

(3)目標(biāo)蛋白的篩選利用了
抗原—抗體雜交
抗原—抗體雜交
方法,其原理是
抗體的結(jié)合具有特異性
抗體的結(jié)合具有特異性

(4)擴(kuò)大培養(yǎng)時,進(jìn)行誘變處理的目的可能是通過提高某些基因的突變率而獲取
具有更強(qiáng)生產(chǎn)目標(biāo)蛋白能力的噬菌體
具有更強(qiáng)生產(chǎn)目標(biāo)蛋白能力的噬菌體
;根據(jù)噬菌體的特征,擴(kuò)大培養(yǎng)體系中必須含有
宿主細(xì)胞
宿主細(xì)胞
,噬菌體才能繁殖。多次篩選后,
目標(biāo)基因高效表達(dá)
目標(biāo)基因高效表達(dá)
的噬菌體得到高度富集。

【答案】DNA的半保留復(fù)制;乙和C;它們的基本組成單位都是脫氧核苷酸,且都具有雙鏈(雙螺旋)結(jié)構(gòu);限制酶和DNA連接酶;抗原—抗體雜交;抗體的結(jié)合具有特異性;具有更強(qiáng)生產(chǎn)目標(biāo)蛋白能力的噬菌體;宿主細(xì)胞;目標(biāo)基因高效表達(dá)
【解答】
【點(diǎn)評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:4引用:1難度:0.6
相似題
  • 1.噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)中,對噬菌體蛋白質(zhì)合成的正確敘述是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2025/1/1 8:0:2組卷:4引用:1難度:0.9
  • 2.如圖是著名的噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)和肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)的部分步驟:
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    (1)赫爾希和蔡斯采用的實(shí)驗(yàn)方法是
     
    ,該實(shí)驗(yàn)?zāi)芊裼?SUP>15N來標(biāo)記,為什么?
     

    (2)若要大量制備32P標(biāo)記的噬菌體,需先用含32P的培養(yǎng)基培養(yǎng)
     
    ,再用噬菌體去感染它.T2噬菌體DNA復(fù)制的場所是
     

    (3)從圖中所示結(jié)果分析,該實(shí)驗(yàn)標(biāo)記的是
     
    (DNA還是蛋白質(zhì)),當(dāng)接種噬菌體后培養(yǎng)時間過長,會發(fā)現(xiàn)上清液中的放射性升高,最可能的原因是復(fù)制增殖后的噬菌體
     

    (4)如圖的“肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)”得出的結(jié)論是
     
    .加熱殺死的S型菌中的DNA仍有活性的原因可能是
     

    發(fā)布:2025/1/3 8:0:1組卷:13引用:1難度:0.5
  • 3.圖1為某同學(xué)重復(fù)了探究生物遺傳物質(zhì)的“T2噬菌體侵染大腸桿菌實(shí)驗(yàn)”(甲、乙)和圖2“肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)”.
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    據(jù)圖回答下列問題:
    (1)圖甲中T2噬菌體DNA復(fù)制的場所是
     

    (2)圖乙中若用含32P的噬菌體侵染大腸桿菌,經(jīng)過離心,上清液也有很低的放射性,原因可能是
     
    .若改用14C、3H、15N等標(biāo)記噬菌體而細(xì)菌未標(biāo)記,在子代噬菌體中,
     
    中能找到標(biāo)記元素.
    (3)研究發(fā)現(xiàn)T2噬菌體屬于噬菌體中的一類,除此之外還有λ噬菌體等,λ噬菌體的性質(zhì)較“溫和”感染細(xì)菌后并不使細(xì)菌死亡而是將自身的DNA插入進(jìn)細(xì)菌的DNA,隨細(xì)菌DNA一起復(fù)制,所以常用于基因工程中做為
     
    (工具).假定原宿主細(xì)胞中某一DNA片段含有3000個堿基對,其中G+C占堿基總數(shù)的30%,插入后的DNA整段轉(zhuǎn)錄形成的mRNA含有4000個堿基,其中A和U占60%,則插入進(jìn)來的噬菌體DNA片段中A+T占該插入片段堿基總數(shù)的比例為
     

    (4)圖2的“肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)”得出的結(jié)論是
     
    .加熱殺死的S型菌中的DNA仍有活性的原因可能是
     

    發(fā)布:2025/1/3 8:0:1組卷:91引用:1難度:0.3
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