中科院動(dòng)物研究所利用CRISPR/Cas9技術(shù),向豬的基因組內(nèi)插入一個(gè)解耦聯(lián)蛋白基因(UCP1)經(jīng)過基因改造的豬瘦肉率高、脂肪少、抗寒能力強(qiáng)。如圖是基因改造過程中涉及的相關(guān)限制酶及酶切位點(diǎn)。請(qǐng)回答下列問題:
(1)圖中的抗生素抗性基因的作用是作為 標(biāo)記標(biāo)記基因,以便于篩選。為了獲取重組質(zhì)粒,除了使用限制酶外,還需使用 DNA連接DNA連接酶。
(2)重組質(zhì)粒上應(yīng)有 RNA聚合酶RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位,以驅(qū)動(dòng)解耦聯(lián)蛋白基因(UCP1)轉(zhuǎn)錄,該部位稱為 啟動(dòng)子啟動(dòng)子。
(3)在構(gòu)建基因表達(dá)載體過程中,為避免出現(xiàn)質(zhì)粒和目的基因自身環(huán)化,常用 BamHⅠ和HindⅢBamHⅠ和HindⅢ兩種限制酶同時(shí)切割質(zhì)粒和UCP1基因。
(4)獲得目的基因后,常采用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因,在此過程中,由于DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA單鏈,只能從 3′3′端延伸DNA單鏈,因此需要加入引物。
(5)科研人員通過 顯微注射顯微注射法,將基因表達(dá)載體導(dǎo)入豬的受精卵中??赏ㄟ^ DNA分子雜交DNA分子雜交技術(shù),來檢測(cè)UCP1基因是否已導(dǎo)入到豬受精卵細(xì)胞。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合.
【答案】標(biāo)記;DNA連接;RNA聚合酶;啟動(dòng)子;BamHⅠ和HindⅢ;3′;顯微注射;DNA分子雜交
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/5/23 20:38:36組卷:22引用:4難度:0.7
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