表面展示技術(shù)是通過重組DNA技術(shù),將外源蛋白與細胞表面的蛋白質(zhì)組裝成融合蛋白,從而可展示在細胞表面?;卮鹣铝袉栴}。
(1)若要將芽孢表面蛋白基因cotB與外源的綠色熒光蛋白基因gfp組裝成融合蛋白,還需要 啟動子,終止子,標記基因(復(fù)制原點)啟動子,終止子,標記基因(復(fù)制原點)結(jié)構(gòu)一起可以構(gòu)建基因表達載體。
(2)芽孢表面蛋白是實現(xiàn)表面展示技術(shù)的關(guān)鍵蛋白,結(jié)合上述材料,試分析該蛋白在表面展示技術(shù)中的作用是 芽孢表面蛋白是一種定位表面的蛋白質(zhì),在與外源蛋白形成整合蛋白后,可將外源蛋白展示/定位在芽孢桿菌表面。芽孢表面蛋白是一種定位表面的蛋白質(zhì),在與外源蛋白形成整合蛋白后,可將外源蛋白展示/定位在芽孢桿菌表面。。
(3)導(dǎo)入基因表達載體后的芽孢桿菌接種在含有 氨芐青霉素(Ampr)氨芐青霉素(Ampr)的固體培養(yǎng)基上,以獲得攜帶載體的單菌落,該過程被稱為微生物的 選擇選擇培養(yǎng)。
(4)培養(yǎng)基中可能既有含基因表達載體的單菌落,也有含空載體的單菌落,因此還需要對DNA進行提取,常用酒精初步分離DNA和蛋白質(zhì),這里酒精的作用 DNA不溶于酒精,某些蛋白質(zhì)溶于酒精DNA不溶于酒精,某些蛋白質(zhì)溶于酒精。
(5)若要確定表面展示技術(shù)在芽孢桿菌上構(gòu)建成功,應(yīng)在紫外光環(huán)境下對其進行 個體(細胞)個體(細胞)水平的檢測。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】啟動子,終止子,標記基因(復(fù)制原點);芽孢表面蛋白是一種定位表面的蛋白質(zhì),在與外源蛋白形成整合蛋白后,可將外源蛋白展示/定位在芽孢桿菌表面。;氨芐青霉素(Ampr);選擇;DNA不溶于酒精,某些蛋白質(zhì)溶于酒精;個體(細胞)
【解答】
【點評】
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