幽門螺桿菌（HP）是定植于胃黏膜表面與黏膜層之間的一種異養(yǎng)微厭氧菌，其與胃炎和胃癌等疾病發(fā)生密切相關(guān)。HP具有強(qiáng)大的定植能力使得其很難被根除，尿素酶被證實(shí)是HP關(guān)鍵的定植因子。請(qǐng)回答下列問題：
（1）HP檢查時(shí)，讓受試者口服用14C標(biāo)記的尿素膠囊，標(biāo)記的尿素可被HP產(chǎn)生的 脲酶脲酶催化分解，一段時(shí)間后收集該受試者吹出的氣體，測(cè)定其中是否含有 14CO214CO2來檢測(cè)HP感染情況。
（2）圖中4支試管分別代表4種微生物在半固體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)狀態(tài)，圖中 ②②號(hào)試管代表幽門螺桿菌的生長(zhǎng)狀態(tài)，④④號(hào)試管代表酵母菌的生長(zhǎng)狀態(tài)。
（3）不使用公筷可能導(dǎo)致HP的交叉感染，提取某HP感染者家庭的100g剩菜，加入無(wú)菌水稀釋至1L。取0.1mL上述稀釋液分別接種到3個(gè)平板培養(yǎng)基中培養(yǎng)，HP菌落數(shù)穩(wěn)定時(shí)計(jì)數(shù)，結(jié)果分別為147、155、163，由實(shí)驗(yàn)可知每克剩菜中含有HP 155155個(gè)。
（4）若要鑒別上述平板中的菌落是否為HP，可向培養(yǎng)基中添加尿素和 酚紅酚紅指示劑。若菌落周圍出現(xiàn) 紅紅色環(huán)帶，則表明該菌落很可能為HP菌落。
（5）抗尿素酶B單克隆抗體可有效抵抗HP定植，制備過程如下：
| 操作步驟 | 目的或結(jié)果 |
| 向小鼠注射尿素酶B，取其脾臟 | 提取免疫后的小鼠的① B淋巴 B淋巴 細(xì)胞 |
| 誘導(dǎo)上述細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合 | 誘導(dǎo)細(xì)胞融合產(chǎn)生多種類型細(xì)胞 |
| 在特定的篩選培養(yǎng)基上培養(yǎng) | 淘汰未融合細(xì)胞和② 自身融合 自身融合 細(xì)胞 |
| 細(xì)胞生長(zhǎng)孔內(nèi)專一抗體檢驗(yàn) | 依據(jù)③ 抗原-抗體雜交 抗原-抗體雜交 原理篩選出所需細(xì)胞，其特點(diǎn)是④既能無(wú)限增殖，又能產(chǎn)生單一抗體 既能無(wú)限增殖，又能產(chǎn)生單一抗體 |
| 轉(zhuǎn)移到健康小鼠腹腔內(nèi) | 從小鼠⑤ 腹水 腹水 中提取抗尿素酶B單克隆抗體 |
【考點(diǎn)】單克隆抗體及其應(yīng)用；微生物的選擇培養(yǎng)（稀釋涂布平板法）；原核細(xì)胞和真核細(xì)胞的形態(tài)和結(jié)構(gòu)的異同；微生物的選擇培養(yǎng)和計(jì)數(shù)．
【答案】脲酶；14CO2；②；④；155；酚紅；紅；B淋巴；自身融合；抗原-抗體雜交；既能無(wú)限增殖，又能產(chǎn)生單一抗體；腹水
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：0引用：2難度：0.6
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1．為實(shí)現(xiàn)對(duì)肝癌的有效治療，研究人員通過比較肝腫瘤細(xì)胞和正常細(xì)胞間的差異，篩選有效的免疫治療靶點(diǎn)，制備相應(yīng)單克隆抗體并構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物。
（1）檢測(cè)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的CLDN6蛋白能夠促進(jìn)腫瘤發(fā)生，選定其作為單克隆抗體的作用靶點(diǎn)。CLDN6蛋白是一個(gè)跨膜蛋白，包括胞外區(qū)、跨膜區(qū)和胞內(nèi)區(qū)，制備免疫小鼠所用的抗原時(shí)，應(yīng)提取區(qū)基因序列用于設(shè)計(jì)抗原。
（2）將CLDN6蛋白抗原注射到小鼠體內(nèi)，從該小鼠脾臟中獲取細(xì)胞，誘導(dǎo)其與骨髓瘤細(xì)胞融合，利用篩選得到雜交瘤細(xì)胞，經(jīng)克隆化培養(yǎng)和抗體陽(yáng)性檢測(cè)，多次篩選得到產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞，最終通過體內(nèi)或體外培養(yǎng)獲得大量單克隆抗體。
（3）將該單克隆抗體與抗癌藥物DMI 結(jié)合構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物（CLDN6-DMI）。用不同濃度的游離DMI、CLDN6-DMI或lgG-DMI（無(wú)關(guān)抗體-DMI）分別處理高表達(dá)CLDN6細(xì)胞和低表達(dá)CLDN6細(xì)胞，檢測(cè)細(xì)胞活力，結(jié)果如圖1：
由圖可知，CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達(dá)CLDN6細(xì)胞，依據(jù)是。
（4）如圖2表示抗體—藥物偶聯(lián)物CLDN6-DMI的作用機(jī)制：由圖分析，CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達(dá)CLDN6細(xì)胞的原因是。發(fā)布：2024/12/19 7:0:1組卷：3引用：1難度：0.6 -
2．為減少鼠源單克隆抗體可能引起的副作用，某研究團(tuán)隊(duì)對(duì)鼠源單克隆抗體F進(jìn)行改造，制備了人—鼠嵌合抗體F′，具體流程為：提取鼠源雜交瘤細(xì)胞RNA，逆轉(zhuǎn)錄后通過PCR擴(kuò)增抗體F的基因序列，將其部分序列用人的相應(yīng)抗體基因序列進(jìn)行替換，再構(gòu)建表達(dá)載體，在體外制備人﹣鼠嵌合抗體F′。為檢測(cè)抗體性質(zhì)，他們測(cè)定了F′單獨(dú)與抗原作用時(shí)對(duì)抗原的結(jié)合能力以及F′和F同時(shí)與抗原作用（F′與F初始濃度相同）時(shí)F′對(duì)抗原的結(jié)合能力，結(jié)果如下圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（ ）
發(fā)布：2024/12/19 1:0:1組卷：39引用：4難度：0.5 -
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發(fā)布：2024/12/19 6:0:1組卷：42引用：2難度：0.6
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