某生物研究小組在實驗室里利用馬鈴薯培養(yǎng)液、無菌水、酵母菌母液等探究不同溫度條件酵母菌種群數(shù)量變化，表1是研究小組設(shè)計的探究方案。
表1

試管編號		A	B	C
管內(nèi)溶液	馬鈴薯培養(yǎng)液/mL	10	10	-
	無菌水/mL	-	-	10
	酵母菌母液/mL	0.1	0.1	0.1
溫度條件	28℃
	5℃

（1）該生物研究小組研究課題是：

探究在不同培養(yǎng)液中不同溫度下酵母菌種群數(shù)量的變化

探究在不同培養(yǎng)液中不同溫度下酵母菌種群數(shù)量的變化

。
（2）實驗步驟：①配制馬鈴薯培養(yǎng)液和酵母菌母液。
②將若干支試管分成A、B、C三組并編號，每組8支。先每次用10mL刻度吸管吸取10mL培養(yǎng)液加入A組和B組試管，用另一支10mL刻度吸管吸取

10mL無菌水

10mL無菌水

加入C組試管。待分裝完畢，每支試管加塞后把試管扎成捆。
③用高壓蒸汽滅菌鍋滅菌，避免其他菌污染。
④用滅菌干凈的1mL刻度吸管每次吸取

0.1

0.1

mL酵母菌母液，滴加到每支試管中，整個接種操作需在酒精燈火焰附近進(jìn)行，以防止雜菌污染。
⑤將A、B、C試管分別置于28℃、5℃、

28

28

℃的恒溫箱中培養(yǎng)。
（3）實驗數(shù)據(jù)分析：通過顯微鏡計數(shù)法計數(shù)培養(yǎng)液中酵母菌的起始數(shù)量，然后每24小時計數(shù)一次，得到表2數(shù)據(jù)。
表2

次數(shù)		1	2	3	4	5	6	7	8
時間/h		0	24	48	72	96	120	144	168
試管	A	0.8×107	5.2×107	5.6×107	4.8×107	？	0.8×107	0.4×107	0.08×107
	B	0.8×107	1.2×107	2×107	2.8×107	3.2×107	3.6×107	3.2×107	3×107
	C	0.8×107	0.4×107	0.1×107	0	0	0	0	0

用血球計數(shù)板（2mm×2mm方格）對A組第5次取樣計數(shù)時，將取樣的1 mL酵母菌培養(yǎng)液加9 mL無菌水稀釋觀察，發(fā)現(xiàn)計數(shù)室內(nèi)（蓋玻片下的培養(yǎng)液厚度為0.1mm）酵母菌平均數(shù)為80，據(jù)此估算10mL培養(yǎng)液中有酵母菌

2×10⁷

2×10⁷

個，與第4次取樣相比，第5次取樣計數(shù)酵母菌數(shù)目發(fā)生顯著變化的原因是

因培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)的大量消耗、代謝廢物的積累、pH值的改變，大量酵母菌死亡

因培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)的大量消耗、代謝廢物的積累、pH值的改變，大量酵母菌死亡

。
（4）與A組相比，B組酵母菌種群數(shù)量增長緩慢的原因是

B組溫度不適合酵母菌繁殖生長

B組溫度不適合酵母菌繁殖生長

。實驗過程中需要控制的無關(guān)變量有

培養(yǎng)液的量、酵母菌母液的量、培養(yǎng)液的pH、溶氧量

培養(yǎng)液的量、酵母菌母液的量、培養(yǎng)液的pH、溶氧量

（至少列舉出兩種）。
（5）實驗結(jié)束后，用試管刷蘸洗滌劑擦洗血球計數(shù)板的做法是錯誤的，正確的方法是

浸泡沖洗

浸泡沖洗

。