R-7是家蠶體內(nèi)的一種小分子非編碼RNA，可與某些mRNA一端的一段非編碼序列（3'-MTR）結(jié)合，進而影響基因的表達。為研究R-7是否影響家蠶基因B（調(diào)控家蠶眼睛發(fā)育）的表達，科研人員將基因B中對應3'-MTR的DNA片段與熒光素酶基因（R-7不影響熒光素酶基因的表達）重組，如圖1所示。將該重組載體導入家蠶胚胎細胞并檢測其表達情況，結(jié)果如圖2所示?；卮鹣铝袉栴}：
（1）若圖1表示一個完整的基因表達載體，則其中至少缺失了 目的基因（或3'-MTR的DNA片段和復制原點）目的基因（或3'-MTR的DNA片段和復制原點），其中的熒光素酶基因相當于 標記基因標記基因。
（2）要想短時間內(nèi)獲得大量目的基因，需要用到的技術(shù)是 PCR擴增技術(shù)PCR擴增技術(shù)，該技術(shù)利用了 DNA熱變性DNA熱變性原理，通過調(diào)節(jié)溫度來控制DNA雙鏈的解聚與結(jié)合。
（3）圖1中構(gòu)建基因表達載體時應將目的基因插入到位點 22，原因是 目的基因應插入啟動子與終止子之間，且不能破壞熒光素酶基因目的基因應插入啟動子與終止子之間，且不能破壞熒光素酶基因。
（4）科研人員從圖2所示的實驗組和對照組細胞中提取蛋白質(zhì)，經(jīng)處理檢測后獲得相對熒光值（在適宜條件下，熒光素酶可催化熒光素發(fā)生氧化反應并發(fā)出熒光）。實驗組為將重組載體導入含R-7的家蠶胚胎細胞中，對照組1為將重組載體導入不含（或去除）R-7的家蠶胚胎細胞中，則對照組2應該為 將含有熒光素酶基因但不含對應3'-MTR的DNA片段的表達載體導入含R-7的家蠶胚胎細胞中將含有熒光素酶基因但不含對應3'-MTR的DNA片段的表達載體導入含R-7的家蠶胚胎細胞中。由圖2結(jié)果推知R-7抑制連接了3′-MTR的DNA片段的基因B表達的 翻譯翻譯過程。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】目的基因（或3'-MTR的DNA片段和復制原點）；標記基因；PCR擴增技術(shù)；DNA熱變性；2；目的基因應插入啟動子與終止子之間，且不能破壞熒光素酶基因；將含有熒光素酶基因但不含對應3'-MTR的DNA片段的表達載體導入含R-7的家蠶胚胎細胞中；翻譯
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：8引用：3難度：0.5
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
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3．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
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