2020年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)授予了兩位開發(fā)出CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)的科學(xué)家，該技術(shù)在實(shí)體瘤研究中得到廣泛應(yīng)用。
（1）Cas9是一種來自細(xì)菌的核酸內(nèi)切酶，其由相關(guān)基因指導(dǎo)在核糖體核糖體上合成，它與sgRNA構(gòu)成的復(fù)合體能與DNA分子特定堿基序列結(jié)合，如圖1所示，據(jù)圖1分析，作用原理是sgRNA能與DNA單鏈進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對(duì)堿基互補(bǔ)配對(duì)，Cas9能在NGGPAM序列（幾乎存在于所有基因中）上游切斷DNA雙鏈的磷酸二酯磷酸二酯鍵。
（2）結(jié)直腸癌是常見的消化道惡性腫瘤，研究發(fā)現(xiàn)APC基因發(fā)生突變引起的結(jié)腸和直腸腺瘤性息肉與結(jié)直腸癌密切相關(guān)。將Cas9Cas9基因及靶向小鼠APC基因的16號(hào)外顯子的雙鏈sgRNA拼接后形成目的基因目的基因與慢病毒載體結(jié)合，導(dǎo)入小鼠結(jié)腸細(xì)胞，獲得APC基因缺失的結(jié)腸細(xì)胞，通過黏膜注射，將APC基因缺失結(jié)腸細(xì)胞原位移植入免疫缺陷小鼠，生成腺瘤，獲得結(jié)直腸癌小鼠模型，請(qǐng)寫出該模型的一種應(yīng)用研究藥物對(duì)結(jié)直腸癌小鼠的治療效果，研究結(jié)直腸癌發(fā)病機(jī)理研究藥物對(duì)結(jié)直腸癌小鼠的治療效果，研究結(jié)直腸癌發(fā)病機(jī)理。
（3）CRISPR/Cas9技術(shù)還可用于結(jié)直腸癌相關(guān)基因功能的研究。研究人員通過CRISPR/Cas9技術(shù)在人結(jié)腸癌細(xì)胞HRT18中敲除產(chǎn)促紅細(xì)胞生成素人干細(xì)胞A1受體基因（EPHA1基因），進(jìn)行細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)。
補(bǔ)充圖中步驟①空質(zhì)粒空質(zhì)粒，②胰蛋白酶或膠原蛋白酶胰蛋白酶或膠原蛋白酶，③貼壁貼壁。由圖可知，與另外兩組相比，48h后c組細(xì)胞劃痕的寬度較小小，說明EPHA1基因可抑制人結(jié)腸癌細(xì)胞擴(kuò)散轉(zhuǎn)移EPHA1基因可抑制人結(jié)腸癌細(xì)胞擴(kuò)散轉(zhuǎn)移。
（4）請(qǐng)寫出CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)其他可能的一項(xiàng)應(yīng)用基因治療、動(dòng)植物品種改良基因治療、動(dòng)植物品種改良。
【考點(diǎn)】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件與過程．
【答案】核糖體；堿基互補(bǔ)配對(duì)；磷酸二酯；Cas9；目的基因；研究藥物對(duì)結(jié)直腸癌小鼠的治療效果，研究結(jié)直腸癌發(fā)病機(jī)理；空質(zhì)粒；胰蛋白酶或膠原蛋白酶；貼壁；??；EPHA1基因可抑制人結(jié)腸癌細(xì)胞擴(kuò)散轉(zhuǎn)移；基因治療、動(dòng)植物品種改良
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：26引用：1難度：0.7
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1．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)是細(xì)胞工程的基本技術(shù)，下列關(guān)于這兩項(xiàng)技術(shù)的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 1:30:1組卷：29引用：2難度：0.7 -
2．回答與基因工程、動(dòng)物克隆和胚胎工程有關(guān)的問題：
（1）幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。在進(jìn)行基因工程操作時(shí)，可以從植物體中提取幾丁質(zhì)酶的mRNA，以mRNA為材料可以獲得cDNA，其原理是。若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。
（2）為了提高動(dòng)物成纖維細(xì)胞克隆形成率，可以選擇適宜的培養(yǎng)基、添加牛血清、以支持生長(zhǎng)等措施。當(dāng)?shù)谝粋€(gè)卡氏瓶中的細(xì)胞濃度不再增加時(shí)，若要細(xì)胞繼續(xù)增殖，可采用的方法是。細(xì)胞培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)箱中通常要維持一定的CO2濃度，CO2的作用是。
（3）下列關(guān)于胚胎工程的敘述，錯(cuò)誤的是
A．在動(dòng)物的飼料中添加一定量的促性腺激素促使超數(shù)排卵
B．若在囊胚期進(jìn)行胚胎分割，內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，滋養(yǎng)成則不必
C．可以從雌性動(dòng)物體內(nèi)卵泡處吸取卵泡液，取出卵母細(xì)胞進(jìn)一步培養(yǎng)成熟
D．胚胎成纖維細(xì)胞可以用于胚胎干細(xì)胞的培養(yǎng)，因?yàn)槠淠芊置谝种萍?xì)胞分化的物質(zhì)。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：3引用：1難度：0.7 -
3．據(jù)國(guó)際糖尿病聯(lián)盟最新數(shù)據(jù)，2021年全球約5.37億成人患有糖尿病，670萬成人因糖尿病或其并發(fā)癥死亡。如圖是研究人員提出的治療方案，請(qǐng)回答下列問題：
（1）從患者體內(nèi)獲得體細(xì)胞后，對(duì)其進(jìn)行的初次培養(yǎng)稱為，培養(yǎng)的細(xì)胞在貼壁生長(zhǎng)至鋪滿培養(yǎng)皿底時(shí)停止分裂，這種現(xiàn)象稱為。一般來說，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要的條件有（少答出兩點(diǎn)）。
（2）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增正常胰島素基因的前提條件是。目前臨床用的胰島素生效較慢，科學(xué)家將胰島素β鏈的第28和29個(gè)氨基酸調(diào)換順序，成功獲得了速效胰島素。生產(chǎn)速效胰島素，需要對(duì)進(jìn)行定向改造。
A.胰島素
B.胰島素mRNA
C.胰島素基因
D.胰島
（3）欲檢測(cè)胰島類似細(xì)胞是否具有胰島B細(xì)胞的正常生理功能，可設(shè)計(jì)如下實(shí)驗(yàn)：將等量的胰島類似細(xì)胞與正常胰島B細(xì)胞分別加入兩組相等濃度的培養(yǎng)液中，適宜且相同條件下進(jìn)行培養(yǎng)，一段時(shí)間后分別檢測(cè)兩組培養(yǎng)液中。
（4）該治療糖尿病的方法與異體移植相比，突出的優(yōu)點(diǎn)是。發(fā)布：2024/12/31 2:30:2組卷：35引用：2難度：0.6
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