器官移植已成為治療臟器功能衰竭的有效手段，但移植排斥是影響移植物和患者存活的主要問題。同種異體排斥反應的細胞學機制主要為T細胞介導的免疫反應。其中白細胞介素-2（IL-2）參與移植排斥反應。白細胞介素-2（IL-2）是主要由活化的CD++細胞產(chǎn)生的免疫調(diào)節(jié)因子，對機體的免疫應答和抗病毒感染等有重要作用?？茖W工作者將含IL-2基因的DNA片段和質(zhì)粒pPIC9K構建成重組質(zhì)粒，并導入酵母菌GS15（組氨酸缺陷菌株，不能合成組氨酸）中，篩選到了能分泌IL-2的工程菌株。請回答：
（1）構建重組質(zhì)粒需要用到的酶有 限制酶和DNA連接酶限制酶和DNA連接酶，質(zhì)粒上的啟動子的作用是 作為RNA聚合酶識別并結合的位點，驅動基因轉錄作為RNA聚合酶識別并結合的位點，驅動基因轉錄。根據(jù)上圖分析，為了構建重組質(zhì)粒應該選用 EcoRⅠ酶和NotⅠ酶EcoRⅠ酶和NotⅠ酶（填酶）分別切割含有IL-2基因的DNA片段和質(zhì)粒。
（2）用不含組氨酸的培養(yǎng)基進行篩選，有導入了質(zhì)粒pPIC9K和導入了重組質(zhì)粒的兩種酵母菌細胞。這兩種類型的細胞能否被篩選出來，若能，則說明篩選的原理；若不能，則說明篩選的措施。 不能，用含有四環(huán)素和組氨酸的培養(yǎng)基進行篩選不能，用含有四環(huán)素和組氨酸的培養(yǎng)基進行篩選。
（3）制備能分泌IL-2的工程菌株宜用酵母菌作為受體細胞，而不適合用大腸桿菌。從細胞結構與功能的角度分析，原因是 酵母菌是真核細胞，其含有的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體能對蛋白質(zhì)進行加工修飾酵母菌是真核細胞，其含有的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體能對蛋白質(zhì)進行加工修飾。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】限制酶和DNA連接酶；作為RNA聚合酶識別并結合的位點，驅動基因轉錄；EcoRⅠ酶和NotⅠ酶；不能，用含有四環(huán)素和組氨酸的培養(yǎng)基進行篩選；酵母菌是真核細胞，其含有的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體能對蛋白質(zhì)進行加工修飾
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/5/7 8:0:9組卷：5引用：2難度：0.6
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質(zhì)工程技術敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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