某科研人員從蘇云金芽孢桿菌中獲取BT毒蛋白基因，并將其導(dǎo)入大豆葉肉細(xì)胞，培育出抗蟲的轉(zhuǎn)基因大豆，主要過程如下。回答下列問題：
（1）質(zhì)粒上存在潮霉素抗性基因的目的是 檢測目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來檢測目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來。
（2）過程①表示利用PCR獲取BT毒蛋白基因，其前提是 根據(jù)BT毒蛋白基因兩端的核苷酸序列合成引物根據(jù)BT毒蛋白基因兩端的核苷酸序列合成引物；在BT毒蛋白基因兩側(cè)分別添加HindⅢ和BamHI限制酶序列，其目的是 讓BT毒蛋白基因與質(zhì)粒定向連接讓BT毒蛋白基因與質(zhì)粒定向連接。
（3）過程①中BT毒蛋白基因連續(xù)擴(kuò)增5次，形成 3232個(gè)BT毒蛋白基因片段，需要 6262個(gè)引物。
（4）過程②構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，將BT毒蛋白基因插入啟動(dòng)子和終止子之間的原因是 保證BT毒蛋白基因能夠在大豆細(xì)胞中表達(dá)保證BT毒蛋白基因能夠在大豆細(xì)胞中表達(dá)。
（5）將重組質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌時(shí)，需要用 Ca2+Ca2+處理農(nóng)桿菌，使其處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)。過程③篩選具有抗蟲能力的大豆，從分子水平上檢測BT毒蛋白基因是否表達(dá)的方法是 抗原—抗體雜交抗原—抗體雜交。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】檢測目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來；根據(jù)BT毒蛋白基因兩端的核苷酸序列合成引物；讓BT毒蛋白基因與質(zhì)粒定向連接；32；62；保證BT毒蛋白基因能夠在大豆細(xì)胞中表達(dá)；Ca2+；抗原—抗體雜交
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：8引用：3難度：0.7
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發(fā)布：2024/12/20 5:0:2組卷：35引用：5難度：0.6 -
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（1）獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應(yīng)用的生物技術(shù)有（答出2項(xiàng)）等。
（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對(duì)目的基因進(jìn)行篩選。
（3）培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程（填序號(hào)）。過程②③采用的方法是。
（4）⑤過程需要用到等植物激素，在誘導(dǎo)愈傷組織分化成幼苗的過程中，這兩種植物激素的比例會(huì)發(fā)生變化，原因是。發(fā)布：2024/12/20 2:30:1組卷：16引用：5難度：0.5 -
3．如表為5種限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)，如圖為某種質(zhì)粒和目的基因，箭頭所指為限制酶酶切位點(diǎn)。現(xiàn)要將圖中的目的基因定向插入到質(zhì)粒中，以制備轉(zhuǎn)基因植株。下列說法正確的是（ ?。?
限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識(shí)別序列及切割位點(diǎn) G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 
發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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