如圖所示為質(zhì)粒B和一個含目的基因的DNA片段示意圖。圖中Ap為氨芐青霉素抗性基因，lacZ為藍色顯色基因（能使含該基因的大腸桿菌菌落呈藍色）。圖中EcoRⅠ、PvuⅠ為兩種限制酶，括號內(nèi)的數(shù)字表示限制酶切割位點與復(fù)制原點的距離。請據(jù)圖分析并回答問題：
（1）外源基因在受體細胞中能啟動表達的關(guān)鍵是載體上具有RNA聚合酶RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位。
（2）將用限制酶PvuⅠPvuⅠ切開的質(zhì)粒B溶液與目的基因溶液混合，加入DNA連接酶連接后，導(dǎo)入大腸桿菌。為了便于篩選，作為受體細胞的大腸桿菌自身不含不含（含/不含）lacZ基因和沒有沒有（有/沒有）氨芐青霉素抗性。導(dǎo)入后應(yīng)從大腸桿菌菌落的顏色和是否抗氨芐青霉素大腸桿菌菌落的顏色和是否抗氨芐青霉素兩個角度對受體細胞進行篩選。
（3）將獲得的重組質(zhì)粒用EcoRⅠ完全酶切并進行電泳觀察，若出現(xiàn)長度為3.1kb和3.63.6kb的片段，則載體和目的基因反向連接。若出現(xiàn)長度為1.11.1kb 和5.65.6kb的片段，則載體和目的基因正向連接。（重組質(zhì)粒上目的基因的插入位點與EcoRⅠ的識別位點之間的堿基對忽略不計）
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】RNA聚合酶；PvuⅠ；不含；沒有；大腸桿菌菌落的顏色和是否抗氨芐青霉素；3.6；1.1；5.6
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：19引用：2難度：0.7
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
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3．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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