黃曲霉是常見(jiàn)于發(fā)霉的糧食、糧制品上的真菌,特別多見(jiàn)于是發(fā)霉的花生、玉米中。黃曲霉素是黃曲霉的代謝產(chǎn)物,具有極強(qiáng)的毒性和致癌性。在高溫多雨潮濕的華南地區(qū)的糧食、食品和飲料中黃曲霉毒素的檢出率比較高??蒲腥藛T用黃曲霉素B1(AFB1)的結(jié)構(gòu)類似物香豆素(C9H6O2)篩選出能高效降解AFB1的菌株,具體過(guò)程如圖所示(序號(hào)代表過(guò)程)。
(1)為了篩選到AFB1降解菌,常從發(fā)霉的花生、玉米中采樣,主要原因是 發(fā)霉花生、玉米中富含AFB1,可能含有較多的AFB1降解菌發(fā)霉花生、玉米中富含AFB1,可能含有較多的AFB1降解菌。篩選AFB1降解菌實(shí)驗(yàn)時(shí),圖中1號(hào)培養(yǎng)基的碳源是 香豆素香豆素。過(guò)程③所需要的主要工具有 無(wú)菌滴管(移液槍/移液管)和無(wú)菌涂布器無(wú)菌滴管(移液槍/移液管)和無(wú)菌涂布器(寫(xiě)出兩種)。
(2)菌體對(duì)有機(jī)物的降解途徑有胞外分泌物降解和菌體吸附降解兩種??蒲腥藛T對(duì)降解菌的發(fā)酵液進(jìn)行離心,發(fā)現(xiàn)上清液中AFB1的殘留率明顯低于菌沉淀液的殘留率。可推測(cè),菌體降解AFB1的途徑主要是 胞外分泌物降解胞外分泌物降解。
(3)經(jīng)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)上清液中存在多種蛋白質(zhì),為驗(yàn)證蛋白質(zhì)K是降解AFB1的有效成分,科研小組利用培養(yǎng)過(guò)降解菌的上清液、蛋白質(zhì)K水解酶液、含AFB1的培養(yǎng)基等為材料,設(shè)計(jì)了如下實(shí)驗(yàn)。請(qǐng)補(bǔ)充完善實(shí)驗(yàn)步驟,并預(yù)測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
實(shí)驗(yàn)步驟:①取兩支試管分別編號(hào)甲、乙。甲、乙兩支試管中分別加入等量的 降解菌的上清液降解菌的上清液。
②甲試管中加入適量的 蛋白質(zhì)K水解酶液蛋白質(zhì)K水解酶液,乙試管中加入等量的 蒸餾水蒸餾水作為對(duì)照。
③一段適當(dāng)?shù)臅r(shí)間后,分別加入等量的含AFB1的培養(yǎng)基含AFB1的培養(yǎng)基。
④分別測(cè)定甲乙試管培養(yǎng)基中AFB1含量。
預(yù)測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果:甲試管培養(yǎng)基中AFB1含量明顯大于乙試管甲試管培養(yǎng)基中AFB1含量明顯大于乙試管。
【答案】發(fā)霉花生、玉米中富含AFB1,可能含有較多的AFB1降解菌;香豆素;無(wú)菌滴管(移液槍/移液管)和無(wú)菌涂布器;胞外分泌物降解;降解菌的上清液;蛋白質(zhì)K水解酶液;蒸餾水;含AFB1的培養(yǎng)基;甲試管培養(yǎng)基中AFB1含量明顯大于乙試管
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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