大腸桿菌因其結(jié)構、代謝和生殖等特點常應用于發(fā)酵工程，特定的重組大腸桿菌生產(chǎn)乳酸效率比乳酸菌更高，雜菌污染是導致大腸桿菌大規(guī)模發(fā)酵失敗的重要原因。研究人員利用基因工程獲得了相關的工程菌用于大規(guī)模生產(chǎn)乳酸?；卮鹣铝袉栴}。
（1）大腸桿菌除了需要圖中葡萄糖為其提供碳源外，還需要的營養(yǎng)成分有 氮源、水、無機鹽氮源、水、無機鹽。
（2）科學家利用重組片段和特定技術敲除原始菌株擬核上的F酶基因，獲得更高效的乳酸發(fā)酵工程菌，過程如圖乙。重組片段上的慶大霉素抗性基因（Gmr）除了能替換掉擬核上的F酶基因外，還起到的 作為標記基因，用于篩選出 F 基因敲除的突變菌株作為標記基因，用于篩選出 F 基因敲除的突變菌株作用。綜合圖甲和圖乙信息，若要進一步提高產(chǎn)物產(chǎn)量，還需要敲除的基因是 T 酶基因T 酶基因。
（3）研究人員利用基因工程技術，使甲酰胺酶基因和亞磷酸脫氫酶基因在大腸桿菌中同時表達，改造出一種加強型大腸桿菌，可以通過控制培養(yǎng)基中的氮源和磷源種類實現(xiàn)高效抑制雜菌污染的目的。研究人員設計引物時，不能包含目的基因的終止密碼子的編碼序列，原因是 若設計引物中含有目的基因的終止密碼子，則核糖體讀到終止密碼子時就停止翻譯，導致目的基因不能正常表達若設計引物中含有目的基因的終止密碼子，則核糖體讀到終止密碼子時就停止翻譯，導致目的基因不能正常表達。引物序列的長度及 G-C 堿基對比例G-C 堿基對比例直接影響著PCR過程中復性溫度的設定。通過PCR分別特異性擴增出甲酰胺酶基因和亞磷酸脫氫酶基因，PCR過程中的引物需要 44種。
【答案】氮源、水、無機鹽；作為標記基因，用于篩選出 F 基因敲除的突變菌株；T 酶基因；若設計引物中含有目的基因的終止密碼子，則核糖體讀到終止密碼子時就停止翻譯，導致目的基因不能正常表達；G-C 堿基對比例；4
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：17引用：1難度：0.5
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