[選修1:生物技術(shù)實(shí)踐]
為了提高牛糞中的纖維素降解效率,篩選牛糞發(fā)酵菌劑的優(yōu)良菌種,研究人員從牛糞中對纖維素降解菌株進(jìn)行初步分離,獲得了能高效分解纖維素的菌株,并測定其纖維素酶活力,再結(jié)合菌落形態(tài)等特征進(jìn)行菌種鑒定。請回答下列問題:
(1)取新鮮牛糞樣品10g,加入裝有90mL無菌水的錐形瓶中,將錐形瓶固定在 搖床搖床上,在37℃下振蕩培養(yǎng)2~3d,進(jìn)行選擇培養(yǎng)。選擇培養(yǎng)的目的是 增加纖維素分解菌的濃度增加纖維素分解菌的濃度。
(2)吸取錐形瓶中的培養(yǎng)液1mL,加入盛有 99mL無菌水的試管中混勻進(jìn)行稀釋,依次稀釋到108倍稀釋度。取不超過 0.10.1mL的105、106、107倍稀釋度的稀釋液分別涂布于羧甲基纖維素鈉培養(yǎng)基上,于37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h。
(3)用接種環(huán)挑取顏色、形態(tài)不一的單菌落,使用 平板劃線平板劃線法接種到羧甲基纖維素鈉培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng),重復(fù)2~3次,直至得到較純的菌株。再挑選單菌落于增菌培養(yǎng)基中培養(yǎng)24h,吸取2μL點(diǎn)種到羧甲基纖維素鈉平板中培養(yǎng)48h后,將培養(yǎng)基用 剛果紅剛果紅溶液覆蓋,10min后,倒去該溶液,再加入NaCl溶液,15min后倒去NaCl溶液,測定透明圈的直徑(H)和菌落直徑(C),若 菌落直徑菌落直徑數(shù)值大,則說明菌體增殖速率快,若 透明圈的直徑/菌落直徑透明圈的直徑/菌落直徑比值大,則說明菌體分解纖維素的能力強(qiáng)。
(4)對篩選出的菌株還要進(jìn)行鑒定和酶活力測定,1個(gè)酶活力單位是指在溫度為25℃,其他條件均為最適的情況下,1min內(nèi)轉(zhuǎn)化為1mmol的底物所需的酶量1min內(nèi)轉(zhuǎn)化為1mmol的底物所需的酶量。
【答案】搖床;增加纖維素分解菌的濃度;9;0.1;平板劃線;剛果紅;菌落直徑;透明圈的直徑/菌落直徑;1min內(nèi)轉(zhuǎn)化為1mmol的底物所需的酶量
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:10引用:2難度:0.6
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