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研究人員利用魚類腸道菌株MA35提取纖維素酶,按照“纖維素酶制備→纖維素酶純化和鑒定→纖維素酶活力檢測→纖維素酶酶學性質研究”的思路開展研究。回答下列問題:
(1)從魚類腸道中提取菌體后接種到
液體培養(yǎng)基
液體培養(yǎng)基
中進行發(fā)酵培養(yǎng),發(fā)酵完畢后將菌體與發(fā)酵液分離,菌體再加入緩沖液重新懸浮,利用超聲波破碎細胞。制備纖維素粗酶液的思路是
將發(fā)酵液和細菌破碎液進行離心分離
將發(fā)酵液和細菌破碎液進行離心分離
。
(2)對獲得的纖維素粗酶液用凝膠色譜柱進行洗脫,該方法純化纖維素酶的原理是
不同質量的蛋白質在凝膠中的移動路線長短和移動的速度不同
不同質量的蛋白質在凝膠中的移動路線長短和移動的速度不同
。純化后的纖維素酶使用
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳
的方法進行純度鑒定。
(3)測定酶活力時,需要以
煮沸滅菌
煮沸滅菌
的酶液作為對照組。實驗組酶液加入羧甲基纖維素鈉溶液,反應30 min后終止反應,以每分鐘釋放1 mmol
葡萄糖
葡萄糖
所需要的酶量作為1個酶活力單位。設置30~80℃,pH為3.0~10.0的條件進行纖維素酶酶學性質研究,主要目的是
探究纖維素酶的最適溫度和最適pH
探究纖維素酶的最適溫度和最適pH
。

【答案】液體培養(yǎng)基;將發(fā)酵液和細菌破碎液進行離心分離;不同質量的蛋白質在凝膠中的移動路線長短和移動的速度不同;SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳;煮沸滅菌;葡萄糖;探究纖維素酶的最適溫度和最適pH
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:29引用:4難度:0.7
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