研究人員利用魚類腸道菌株MA35提取纖維素酶,按照“纖維素酶制備→纖維素酶純化和鑒定→纖維素酶活力檢測→纖維素酶酶學性質研究”的思路開展研究。回答下列問題:
(1)從魚類腸道中提取菌體后接種到 液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基中進行發(fā)酵培養(yǎng),發(fā)酵完畢后將菌體與發(fā)酵液分離,菌體再加入緩沖液重新懸浮,利用超聲波破碎細胞。制備纖維素粗酶液的思路是 將發(fā)酵液和細菌破碎液進行離心分離將發(fā)酵液和細菌破碎液進行離心分離。
(2)對獲得的纖維素粗酶液用凝膠色譜柱進行洗脫,該方法純化纖維素酶的原理是 不同質量的蛋白質在凝膠中的移動路線長短和移動的速度不同不同質量的蛋白質在凝膠中的移動路線長短和移動的速度不同。純化后的纖維素酶使用 SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳的方法進行純度鑒定。
(3)測定酶活力時,需要以 煮沸滅菌煮沸滅菌的酶液作為對照組。實驗組酶液加入羧甲基纖維素鈉溶液,反應30 min后終止反應,以每分鐘釋放1 mmol 葡萄糖葡萄糖所需要的酶量作為1個酶活力單位。設置30~80℃,pH為3.0~10.0的條件進行纖維素酶酶學性質研究,主要目的是 探究纖維素酶的最適溫度和最適pH探究纖維素酶的最適溫度和最適pH。
【答案】液體培養(yǎng)基;將發(fā)酵液和細菌破碎液進行離心分離;不同質量的蛋白質在凝膠中的移動路線長短和移動的速度不同;SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳;煮沸滅菌;葡萄糖;探究纖維素酶的最適溫度和最適pH
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:29引用:4難度:0.7
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