大腸菌群是指一類在35～37℃條件下培養(yǎng)48 h,能發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣的需氧和兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽孢桿菌的總稱，大腸桿菌屬于大腸菌群的一種。我國《生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》中關(guān)于生活飲用水的細(xì)菌標(biāo)準(zhǔn)是：一、細(xì)菌總數(shù)1 mL水中不超過100個(gè)；二、大腸桿菌數(shù)1 L水中不超過3個(gè)。國標(biāo)一般采用多管發(fā)酵法檢測樣品中大腸菌群數(shù)，具體分為三步：

蛋白胨	10.0
牛肉膏	3.0
乳糖	5.0
氯化鈉	5.0
pH	7.3±0.2
H2O	定容至1000 mL

①初發(fā)酵試驗(yàn)：將待測樣品稀釋后，選擇3個(gè)稀釋度，每個(gè)稀釋度分別接種到5支發(fā)酵管中，37℃培養(yǎng)48 h,觀察是否產(chǎn)氣。
②平板分離：將產(chǎn)氣發(fā)酵管中的菌液分別接種于伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基（生長在此培養(yǎng)基上的大腸菌群呈深紫色，有金屬光澤）上，置于37℃恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)24h,觀察菌落形態(tài)。
③復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)：挑取平板上呈深紫色，有金屬光澤的菌落，進(jìn)行染色鏡檢。將鏡檢為革蘭氏陰性無芽孢桿菌的菌株重復(fù)初步發(fā)酵試驗(yàn)。最后根據(jù)證實(shí)為大腸桿菌陽性的管數(shù)，按統(tǒng)計(jì)學(xué)原理即可得出大腸菌群數(shù)（每升或每100 毫升中的個(gè)數(shù)）。
（1）初發(fā)酵乳糖蛋白胨培養(yǎng)基配方（g/L）如表所示，按物理性質(zhì)分類，乳糖蛋白胨培養(yǎng)基屬于

液體

液體

培養(yǎng)基，其中的碳源有

牛肉膏、乳糖

牛肉膏、乳糖

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（2）若檢測飲用水中的大腸桿菌數(shù)，則①步驟無須稀釋，原因

飲用水中大腸桿菌數(shù)非常少

飲用水中大腸桿菌數(shù)非常少

，①步 驟每個(gè)稀釋度分別接種到5支發(fā)酵管中的原因是

平行重復(fù)實(shí)驗(yàn)，減小實(shí)驗(yàn)誤差

平行重復(fù)實(shí)驗(yàn)，減小實(shí)驗(yàn)誤差

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（3）②步驟中不能直接用涂布器把菌液涂布在平板上進(jìn)行大腸菌群計(jì)數(shù)，原因是

初發(fā)酵過程擴(kuò)大了大腸菌群的數(shù)量，若使用涂布法可能由于菌液中細(xì)菌數(shù)目過多得不到單菌落

初發(fā)酵過程擴(kuò)大了大腸菌群的數(shù)量，若使用涂布法可能由于菌液中細(xì)菌數(shù)目過多得不到單菌落

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（4）伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基在配制后通常用

高壓蒸汽滅菌

高壓蒸汽滅菌

法進(jìn)行滅菌，③步驟中只能挑取符合特征的菌落其中的一小部分進(jìn)行鏡檢，這是因?yàn)?

鏡檢為革蘭氏陰性無芽孢桿菌的菌株還需重復(fù)初步發(fā)酵試驗(yàn)，而鏡檢的菌株因?yàn)殡s菌污染無法使用

鏡檢為革蘭氏陰性無芽孢桿菌的菌株還需重復(fù)初步發(fā)酵試驗(yàn)，而鏡檢的菌株因?yàn)殡s菌污染無法使用

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