為保障公共健康,需要定期對公共飲用水進行衛(wèi)生檢測。居于大腸中的各種細菌統(tǒng)稱為大腸菌群。一般用大腸菌群作為水體受糞便污染的指示菌,飲用水的衛(wèi)生標準是100mL不得檢出大腸菌群(或者1000mL飲用水中不超過3個大腸桿菌)。若要確定飲用水是否合格,可采用膜過濾法檢測飲用水中的大腸菌群,過程如下圖所示:
(1)大腸桿菌在人體腸道內(nèi)生存時,可發(fā)酵多種糖類產(chǎn)酸、產(chǎn)氣,隨糞便排出后在水體中存活時間比其他病原微生物略長,搖床震蕩培養(yǎng)更利于其快速繁殖。據(jù)此推斷,大腸桿菌代謝類型為 CC。
A.自養(yǎng)需氧型
B.異養(yǎng)厭氧型
C.異養(yǎng)兼性厭氧型
D.自養(yǎng)厭氧型
(2)檢測前需要進行滅菌處理的材料用具有 abcdabcd(選擇字母代號填寫);它們均可以采用 高壓蒸汽滅菌高壓蒸汽滅菌法滅菌。
a.水樣收集瓶
b.濾膜
c.培養(yǎng)基
d.鑷子
e.水樣
(3)完成過濾后需將濾膜的 A面A面(A面/B面)接觸配置好的培養(yǎng)基,此過程在微生物實驗操作中稱為 接種接種。
(4)不用稀釋涂布平板法檢測飲用水中的大腸菌群的原因是:飲用水中大腸桿菌數(shù)量太少,如果梯度稀釋,最后培養(yǎng)出來的菌落數(shù)可能不在30-300范圍內(nèi)飲用水中大腸桿菌數(shù)量太少,如果梯度稀釋,最后培養(yǎng)出來的菌落數(shù)可能不在30-300范圍內(nèi),用上圖方法觀察樣本菌落時是否需要設(shè)置對照組?需要需要。為什么?需判斷培養(yǎng)基是否被污染需判斷培養(yǎng)基是否被污染。
(5)KONFIRM培養(yǎng)基可以檢測大腸桿菌的存在。KONFIRM中含有ONPG和MUG可作碳源,色氨酸可作為氮源。在檢測大腸菌群時,檢測指標如下表所示。
菌群 | 檢測項目及原理 |
大腸菌群(有β-半乳糖苷酶) | ONPG檢測:β-半乳糖苷酶水解無色的ONPG為黃色物質(zhì) |
腸桿菌群(降解色氨酸為吲哚) | 吲哚檢測:吲哚可與特定顯影劑顯為綠色 |
大腸桿菌(有β-葡萄糖醛酸酶) | MUG檢測:β-葡萄糖醛酸酶降解 MUG為具有熒光的物質(zhì) |
結(jié)合表中內(nèi)容分析,若上述檢測結(jié)果為
d
d
(選擇字母代號填寫),則可以確定待測菌為大腸桿菌。a.ONPG檢測和吲哚檢測為陽性,MUG檢測為陰性
b.吲哚檢測為陽性,ONPG檢測和MUG檢測為陰性
c.ONPG檢測、MUG檢測、吲哚檢測均為陰性
d.ONPG檢測、MUG檢測、吲哚檢測均為陽性
【答案】C;abcd;高壓蒸汽滅菌;A面;接種;飲用水中大腸桿菌數(shù)量太少,如果梯度稀釋,最后培養(yǎng)出來的菌落數(shù)可能不在30-300范圍內(nèi);需要;需判斷培養(yǎng)基是否被污染;d
【解答】
【點評】
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