聚羥基丁酸酯（PHB）是某些細(xì)菌在碳源充足，氮源缺乏狀態(tài)下產(chǎn)生的一類顆粒狀、可作為細(xì)菌體內(nèi)碳源和能量儲備物的高分子化合物，能被蘇丹染料染色，可溶于氯仿。PHB具有生物可降解性和生物相容性，用于可降解包裝材料及醫(yī)藥行業(yè)。天然菌中的PHB產(chǎn)量較低，對天然菌進(jìn)行誘變和篩選可得到高產(chǎn)PHB合成菌。
（1）PHB合成菌的分離培養(yǎng)基的成分為葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨、NaCl和瓊脂，該培養(yǎng)基中氮源主要來自

蛋白胨

蛋白胨

，為使PHB合成菌胞體內(nèi)積聚更多PHB，該培養(yǎng)基成分配比的特點(diǎn)是

氮源較低

氮源較低

。
（2）將等濃度土壤稀釋液接種在PHB分離培養(yǎng)基上后，甲組用紫外線照射，乙組不作處理。培養(yǎng)一段時間后，發(fā)現(xiàn)甲組的菌落數(shù)少于乙組，原因是

紫外線會殺死細(xì)菌

紫外線會殺死細(xì)菌

。通過顯微觀察法初篩PHB合成菌的方法是

在培養(yǎng)基中加入蘇丹染料，然后在顯微鏡下觀察，有較多橘黃色顆粒的細(xì)菌即為PHB合成菌

在培養(yǎng)基中加入蘇丹染料，然后在顯微鏡下觀察，有較多橘黃色顆粒的細(xì)菌即為PHB合成菌

。復(fù)篩時需要提取胞體內(nèi)的PHB，方法是

細(xì)胞破碎和用氯仿來萃取PHB，從而提取胞體內(nèi)的PHB

細(xì)胞破碎和用氯仿來萃取PHB，從而提取胞體內(nèi)的PHB

。
（3）對復(fù)篩得到的A～E五個菌株單獨(dú)培養(yǎng)，檢測PHB產(chǎn)量，結(jié)果如圖。A～E株菌中適于作工程菌的是

菌株D

菌株D

，其它菌株不適合作工程菌的原因是

PHB產(chǎn)量較低、不穩(wěn)定、合成效率較差

PHB產(chǎn)量較低、不穩(wěn)定、合成效率較差

。

（4）在發(fā)酵罐中連續(xù)發(fā)酵生產(chǎn)PHB時，除控制發(fā)酵溫度、pH并隨時檢測培養(yǎng)液中PHB合成菌的數(shù)量外，還應(yīng)

檢測PHB濃度、及時添加必需的營養(yǎng)組分

檢測PHB濃度、及時添加必需的營養(yǎng)組分

（答出2條）。